鸡β2-微球蛋白在马立克氏病毒感染不同细胞中基因表达水平检测.pdfVIP

788蟠》2010年学术年会 T060114 鸡p2．微球蛋白在马立克氏病毒感染的不同细胞中 基因表达水平检测 郁川 刘 秋钱琨金文杰梅梅 范忠军 胡序明 邵红霞秦爱建’ 扬州大学兽医学院，江苏省动物预防医学重点实验宣，江苏扬州 225009 13 C 2．微球蛋白 13 2M 是组成MHCI类分子复合体的轻链分子，对于MHI类 2-microglobulin，13 分子在细胞表面稳定表达和有效递呈抗原肽必不可少。不仅如此，肿瘤的发生、 发展与132M关系十 2M可作为肿瘤恶化、转归重要的标记。马立克氏病是由马立克氏病病毒 分密切，并且大量研究表明13 MDv 引起的一种鸡的高度接触、传染性的恶性淋巴肿瘤性疾病，也是目前唯一能够以疫苗控制的 致肿瘤性疾病。对MDV致病机制的深入研究，不仅可以作为人类了解病毒致肿瘤机制的模型，而且还 13 更有助于人们对MD的有效控制。鉴于鸡132．微球蛋白 ch2M 在MDV致肿瘤过程中的作用仍未见 13 详细报道。因此，本研究应用荧光定量PCR技术对ch2M在MDV感染不同细胞中基因表达水平进行检 13 测，以初步探索ch2M是否可作为MDV致肿瘤过程中新靶位的可能性。 主要材料与方法 马立克肿瘤细胞系MDCC．MSBl，MDV强毒株GA株和超强毒株RBlB株由本室保存； MSBl细胞培养过程中分别加入含或不含25 h和48h后应用荧光定 ug／rnLBUdR Sigma ，于培养24 量PCR对chB2M基因表达水平进行检测；按常规方法制备鸡胚成纤维细胞，次代消化后GA株攻毒，分 132M基因表达水平；另外，应用RBlB攻毒鸡后分别于不同时间点分离外周血淋 别于不同时间点检测ch 132M基因表达水平。 巴细胞，提取总RNA，应用荧光定量PCR方法分别检测攻毒与对照组ch 结果与讨论 13 本实验室在前期蛋白质组学研究中业已发现感染RBlB鸡皮肤中ch2M显著上调，然而关于鸡B B2M明显上调，特别于前期24h基因表达水平上调显著 尸≮O．01 ；另 由潜伏状态向感染过程转化时ch 13 ch h，48h，72 外，作者另通过GA株感染CEF后发现， 2M在马立克感染CEF前期第24 h较对照组明 显升高 P 0．01 ，呈逐渐上升趋势，而于第5d，第7d低于对照组 尸≮O．01 ；感兴趣的是，MDV超强 13 d，7 毒株RBlB感染鸡后，外周血淋巴细胞中ch2M在感染前期第4 d与对照组相比较明显上调 13 P 0．05 ，而于14d，28d表达下降。以上结果均证实，ch2M在MDV感染过程中具有十分重要的作 13 用，特别是在感染前期明显上调，这也进一步提示ch2M在前期MDV感染过程中可作为进一步恶化的 13 重要标记。然而ch2M在MDV致肿瘤过程中的生物学功能仍需进一步深入研究，这也是我们下一步研 究的重点。 参考文献 略 。通讯作者：秦爱建，教授，博士生导师。E-mail：aijian@yzu．edu．∞。