极化荧光在高通量药物筛选中的应用.pdfVIP

药学学报 A cta Pharm aceu tica Sin ica 2005, 40 (4) : 289 - 293 ·289 · 极化荧光在高通量药物筛选中的应用 张天泰 , 杜冠华 (中国医学科学院、中国协和医科大学 药物研究所 , 北京 100050) 关键词 : 极化荧光 ; 高通量筛选 ; 新药发现 中图分类号 : R965. 1　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 0513 - 4870 (2005) 04 - 0289 - 05 Applica tion of fluorescence polar iza tionba sed a ssay in h igh throughput screen ing ZHAN G Tiantai, DU Guanhua ( Ins titu te of M a teria M ed ica, Ch inese A cadem y of M ed ica l S ciences and P ek ing Un ion M ed ica l Colleg e, B eij ing 100050, Ch ina) Key word s: fluore scence po larization; h igh throughp u t screen ing; new drug discovery 1　前言 消除了高通量药物筛选分析检测技术这一瓶颈 ,使 基于荧光技术的检测分析方法是近年来被应用 H TS每天检测化合物的量达到 10 万个以上的超高 ( ) ( ) 于药物高通量筛选 h ighthroughp u t screen ing, H TS 通量筛选 uH TS 的同时 ,保证了活性化合物的发 的重要方法之一 ,荧光检测方法具有灵敏度高 、方法 现 [ 1 ] 。 简便的优点 , 目前应用于 H TS的荧光技术包括均相 2　极化荧光概述 时间分辨荧光分析法 ( homogeneou s tim e re so lved 2. 1　极化荧光的理论基础 　极化荧光方法的理论 fluore scence, H TRF ) , 荧光共振 能量传 递 分 析 法 是基于分子在均相溶液中的自由旋转 , 当一个荧光 ( fluore scence re sonance energy tran sfer, FR ET) ,荧光 标记的分子被一个平面的极化光所激发时 ,其发射 关联光谱法 ( fluore scence correlation sp ectro scop y, 光可发射到一个固定的平面 ,而该发射光的极化水 FCS) , 极化荧光分析法 ( fluore scence po larization , 平与分子的旋转速度成反比。对于大的荧光标记分 FP) 。 子来说 ,在激发态仍然相对稳定 ,在激发和发射之 与其他方法比较 , FP 最大的优点在于 :生物分 间 ,光的极化几乎不改变 ; 而对于小的荧光标记分 ( ) 子 ,在激发态时处于高速旋转状态 ,而在激发和发射 子之间相互作用后不用过滤分离游离 未结合 的 荧光标记物 ,而直接测定信号的 “同质 ”技术 ,整个 之间光的极化有