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变异黄芪毒性成分的分离与鉴定 赵宝玉，谭承建，樊月圆，樊泽锋，王银朝，董 强 (西北农林科技大学 动物科技学院，陕西 杨凌 712100) 摘 要：采用植物化学成分系统研究的方法，从变异黄芪醇提总浸膏中分段萃取得到石油醚提取部分、氯 仿提取部分、乙酸乙酯提取部分和正丁醇提取部分。正丁醇提取部分经聚酰胺柱和硅胶柱色谱分离、薄层 1 13 层析检测和升华技术分离纯化出一种白色针状结晶，通过熔点测定和IR、MS、 HNMR、 CNMR波谱分析鉴定 为苦马豆素。并通过与同类植物的比较分析，证明苦马豆素就是变异黄芪的主要有毒成分。 关键词：变异黄芪；苦马豆素；毒草；疯草 近年来由于干旱，导致草场上许多可食牧草生长不良，而毒草却大量滋生蔓延，使许多家畜因可食牧 草缺乏而被迫采食毒草发生中毒，严重者导致死亡。作者 2003 年 7 月在甘肃民勤县草场的一次调查中发 现，当地山羊由于采食变异黄芪（Astragalus variabilis Bunge ）有20 ％～50 ％的山羊发生中毒，中毒山羊 死亡率为 100 ％，给当地畜牧业造成极大的经济损失。变异黄芪系豆科黄芪属 （Astragalus ）多年生草本植 物，具有耐干旱、耐贫瘠、耐盐碱等特性，主要生长在海拔 900m～1900m的荒漠及半荒漠地方，半固定沙 丘间，沙漠以及戈壁，在我国变异黄芪主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海、新疆等地[1-3] 。椐资料报道， 内蒙古自治区阿拉善盟阿左旗吉兰太镇等 14 个苏木（乡镇），变异黄芪分布面积 266 万hm2 ，占可利用草 场面积的 25%，每年因采食变异黄芪中毒牲畜达 20 万头（只），近 10 年来造成的直接经济损失达 300 多 万元[4] 2 。2004 年，仅阿拉善左旗北部的图克木、乌力吉、银根三苏木 （乡镇）就有 17.58 万hm 草场受到变 异黄芪侵害，导致 6.8 万余头 （只）牲畜中毒，1180 头 （只）牲畜死亡，造成直接经济损失 104 万元。而 且，毒草变异黄芪的面积还在迅速扩大，严重危害这些地区畜牧业的可持续发展。 豆科黄芪属 （Astragalus ）和棘豆属 （Oxytropis ）有毒植物统称为疯草 （locoweed ）。早在 1984 年，Tulsiani 等[5]首次证明苦马豆素是疯草中毒的主要致病因素。在我国，变异黄芪毒性成分的研究始于上世纪 90 年代， 黄有德等[6]从变异黄芪中分离出两种单体，其中一种通过熔点、红外光谱、紫外光谱、液相色谱、元素分 析初步鉴定为苦马豆素，当时由于分离纯品量少，未做质谱和核磁共振谱。赵宝玉[4]通过高分辨质谱分析， 从内蒙古阿拉善盟阿左旗生长的变异黄芪中鉴定出 4 种吲哚里西啶生物碱即苦马豆素、斑荚素、栗精胺和 1-羟基吲哚里西啶。陈绍淑等[7]从采 自于内蒙古阿拉善左旗草场的变异黄芪中分离出苦马豆素。从植物化 学的角度来讲，同种植物可能因为产地和生长环境的不同，可能在毒性成分或有效成分的表现上有所不同。 因此，为了搞清楚甘肃民勤草场生长的变异黄芪的毒性成分，为今后该地区动物变异黄芪中毒病的控制及 其变异黄芪药理活性研究提供理论依据，本试验采用化学成分系统分析的方法从变异黄芪中分离得到一种 白色针状结晶，通过熔点和IR 、MS 、1 13 HNMR 、 CNMR鉴定为苦马豆素，现报告如下。 1 材料与方法 1.1 植物样品 变异黄芪地上部分，2002 年 7 月采于甘肃民勤县花儿圆乡草场，正是花果期，自然干燥、粉碎后置阴 凉干燥处备用。植物标本由本校生命科学院植物研究所张跃进研究员鉴定。 1.2 主要试剂与仪器 薄层层析用硅胶 GF254 ，青岛海洋化工有限公司生产；羧甲基纤维素钠 （CMCNa），中国医药集团上海 化学试剂公司生产；柱层层析用硅胶，200～300 目，青岛海洋化工有限公司生产；柱层析用聚酰胺，中国 医药集团上海化学试剂公司生产，30～60 目。苦马豆素纯品由西