rAAV2VEGF165治疗小型猪急性冠状动脉闭塞的有效性的研究.pdfVIP

355· 生垦佥厶!坚壁痘堂苤查!坚至!!旦筮!!鲞箜!塑￡!垫』虫!!璺塑!￡!型i堂!坠竺!迪坚!Q堕!y塑!!!盟!：j ．基础研究． rAAV2一VEGF。65治疗小型猪急性冠状动脉 闭塞的有效性研究 蒋捷 邓晓莉 陈明 杨阳 施冰康禹 吴小兵 高炜 【摘要】 目的在小型猪急性冠状动脉(冠脉)闭塞模型上，探讨重组腺相关病毒载体携带人血 管内皮生长因子。。基因(rAAV2一VEGE。)治疗冠脉闭塞性疾病的有效性及其量效关系，为进一步应用 rAAV2～VEGF。。治疗慢性心肌缺血的研究探索较合适的剂量。方法以微开胸心肌内注射的方法将 rAAv2～VEGFI∞导入小型猪心肌，实验组分成4个剂量组(n=3)：1×10“v．g(virnsgenome)，5×lO“v．g， 1×10”v．g，5×10”v．g。对照组(n=3)注射磷酸盐缓冲液(PBS)。采用RT-PCR以及免疫组化方法观 察各组VEGF。。mRNA和蛋白的表达，通过心肌血管计数及冠脉造影，观察各剂量组促进血管生成的 生物学效应。结果术后4周，各实验组心肌组织均可检测到VEGF．。mRNA的表达，且各组VEGF。。 蛋白表达水平均高于对照组；1X10”v．g组及5×10”v．g组心肌毛细血管密度大于对照组，5×10“v．g 组及其以上剂量组冠脉侧支循环分级的增加优于对照组。结论 心肌内注射rAAV2一VEGF．。能在缺 血心肌中有效表达VEGF mRNA及其蛋白，在一定剂量范围，rAAV2一VEGF。能够增加缺血心肌毛细血 管密度，促进闭塞冠脉的侧支血管生成。结果显示，在小型猪心肌缺血模型上，rAAV2一VEGF，。1×10” v．g是较理想的剂量。 【关键词】血管内皮生长因子；心肌缺血；基因疗法；依赖病毒 Inductionofneovasculadzafionin recombinantadeno-associatedvirus2vector human by encoding pigs cDNAJIANG觑，DENG VEGFl65 Xiaoli，CHENMing，eta1．DepartmentofCardiology，PekingUinvenity First 100034，China Hospital，Being To theeffectof adeno-asseciatedVirus2 【Abstract】Objectiveinvestigate rAAV2一ⅦGFl65(recombinant vector dose-effect in acute cDNA)in swine encodingVEGFl65 stimulatingangiogenesis，itsrelationship coronary occlusion tosearchforasuitabledoseforfurther inswine ischemiamodel． model，and investigationmyocardium Methods ofLAD(1eftanterior artery)wasinswinemodlesvianli血一 Ligation descendingcoronary performed buffer around saline(control thoraco