白藜芦醇对慢性脑低灌注大鼠认知功能损害的保护作用.pdfVIP

醇对血管性认知功能损害的影响及其可能的机制。 分钟2次。阴性对照滴加一抗时用PBS代替。⑤二抗孵育：滴 加适当稀释的生物素化二抗，室温l小时。PBS漂洗5分钟×3 材料与方法 次。⑥滴加适当比例稀释的过氧化物酶标记抗生物寨蛋白链 一、实验动物 菌素复合物。25℃孵育10分钟。⑦DAB显色。⑧显色增强：0． 健康成年雄性v,ristar大鼠36只，体重250—3009，购自湖 5％硫酸铜／PBSfrween25℃孵育3分钟，蒸馏水漂洗。⑨PBS 北省实验动物中心，在具有通风设备的动物房笼养，每笼2—3 终止反应、脱水、透明及封片。⑩在400倍的光镜下采用生物医 只。室温保持在23±loC实验过程中给予充足的实物和水。 学图像分析系统计数顶叶皮质及海马CAl区的积分光密度值 二、慢性脑低灌注模型的建立 (100)。 随机将大鼠分为假手术组(Sham—operated)、2VO对照组 七、图像和统计学分析 (2vocontr01)、2V0+白藜芦醇组(2V0+rtm)。每组均12只。 免疫组化染色阳性反应为细胞膜呈黄棕色。Image—Pro 参照I．iu汪1的方法制备慢性脑低灌注动物模型。大鼠术前l天Plus 6．0图像分析软件测量目标区域阳性细胞的IOD值，分析 禁食和禁水，用10％水合氯醛(350,ng／i,g)腹腔麻醉，颈前部沿 正中切开。分离双侧颈总动脉，双重丝线结扎，然后缝合皮肤。 Prisln 5．0软件进行统计分析。l～lorris水迷宫逃 表示，GraphPad 术中大鼠体温保持在(37．5±0．5)℃，术后大鼠放置在恒温毯 逸潜伏期的比较采用双因东方差分析。两两比较采用Bonferroni 上直至大鼠从麻醉中苏醒。假手术组大鼠除不结扎颈总动脉 检验。其他数据采用单因素方差分析，两两比较采用Tukey检 外。其他操作与其他动物相同。 验。P0．05被认为有统计学意义。 三、给药方法 结果 所有大鼠在手术后4周开始给药，假手术组和2VO对照组 每天给予对照腹腔注射，2V0加白藜芦醇组每天给予溶于对照 一、Morris水迷宫行为学测试 (50％乙醇)的白藜芦醇[购自西格玛一奥德里奇(上海)贸易大鼠在连续给予4周的白藜芦醇或对照腹腔注射后，进行 有限公司]20,ng／i,g腹腔注射，共持续四周。 四、Norris水迷宫行为测试 5天的训练，每天记录大鼠从4个象限入水至找到平台的潜伏 进行水迷宫实验的大鼠共17只(假手术组6只，2VO对照期，将大鼠每天4个象限的潜伏期取平均值即可得到大鼠每天 5只．2VO+白藜芦醇组6只)。Norris水迷宫为直径150锄，高的平均潜伏期。在测试的前二天，各组大鼠之间的平均潜伏期 60 没有统计学上的差异(P0．05)。从第三天开始，慢性脑低灌 cm的圆形水池，水深32era。在池壁上标4个人水点，将水池 等分为四个象限。