脊髓半横断损伤后大鼠运动终板的氯化金染色研究.pdfVIP

维普资讯 · 48 · SICHUANJOURNALOFANATOMYVOL ． 14 NO．3 2006 · 短篇报道 · 脊髓半横断损伤后大 鼠运动终板的氯化金染色研究 段 平 国，刘德明 ，杨宝林 (南昌大学医学院人体解剖学教研室，江西 南昌 330006) 【中图分类号】 R361．1 【文献标识码】 A 脊髓损伤 (SpinalCordInjury，SCI)是一种严重危害人类 至肌组织变成金黄色。取出肌组织用滤纸吸干 ，人 2O 的甲 健康的疾病 。SCI后，受脊髓支配的骨骼肌因失去脊髓的神经 酸溶液中还原 12~24h至肌组织变成棕褐色。蒸馏水洗 5～6 支配而废用及没有神经营养作用而发生萎缩 ，影响骨骼肌功 次，约 1h，滤纸吸干，最后放人纯甘油中过夜保存。 能的恢复。临床或实验过程中经常需要确定肌肉组织神经支 I．5 制片：将肌条剪成米粒大小的组织块 ，用滤纸吸干置于 配情况。上运动神经元损伤后骨骼肌运动终板存在退变现 载玻片上，滴一滴甘油明胶，加盖玻片压平至肌纤维全部均匀 象口]，然而它的退变机制尚不清楚。本实验拟通过观察脊髓 摊开在载玻片上，在显微镜下观察。 右半横断损伤后不同时相损伤侧肌肉运动终板的退变情况， 2 结果 以进一步探讨SCI大鼠运动终板的退变机制。 光镜下观察，正常组肌纤维排列有序，运动终板体积完整 1 材料与方法 呈椭圆或卵圆形，轴索终未形成众多细支盘绕在肌纤维上，可 1．1 分组：选用健康成年SD大鼠3O只，雌雄不拘，体重220 见较多终板核，局部肌浆浓聚(图A)。SCIlw、2w组运动终 ~ 250g。大鼠随机分为 SCIlw、2w、4w、8w和正常组 ，每组各 板在着色、数量上与正常组无明显差别 (图B)。而SCI4w组 6只。 肌纤维运动终板开始出现退变，终板染色变浅 ，轴索终末分枝 1．2 脊髓损伤模型制备：SD大 鼠腹腔麻醉 (3 戊巴比妥钠 减少 ，终板核减少，肌浆淡染，部分终板边缘皱缩 ，中央出现空 30mg／kg)后，以T9为中心，取背部正中线切 口，逐层切开，暴 泡样淡染区(图C)，与前2组比较有差别 (PO．05)。SCI8w 露T9棘突及椎板 ，打开椎管 ，正中线切开硬膜后 ，用虹膜刀自 组的运动终板明显退变 ，出现大的染色空白区，终板减少甚至 脊髓后正中沟垂直插入，向右半侧横向切开，并去除约 2mm 消失 ，显示模糊的轮廓 (图D)。具体结果见表和图。 脊髓组织。正常组同法暴露，但不损伤脊髓。术后缝合伤 口， 表 各组大鼠右侧腓肠肌运动终板的变化(U，Yd=s) 消毒，归笼饲养。 1．3 取材 ：将实验动物分别于相应时相麻醉，用 4 多聚甲 醛 (pH7．4)经心主动脉插管灌注，然后取其损伤侧腓肠肌做 氯化金染色。 1．4 氯化金染色[2：灌注后切取腓肠肌肌腹中部神经人肌点 处 0．8cm的整段肌肉，生理盐水洗后沿肌纤维方向剪成约8 ×lmm肌条，放人2O 的甲酸溶液中固定 1～1．5h，至肌组 织呈透明状；将已透明的肌条从甲酸中取出后人蒸馏水洗一 *：与正常纽、SCIlw组比较PO．05，#：与各组比较PO．01 次，用滤纸吸干 ，人 1 氯化金水溶液中(避光)浸染 1．5～2h 图C 运动终板出现退变。终板染色 图D 运动终板退变明显。轴突终