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桉树组织培养快繁技术 林萦燕 农业技术工程系02级应用生物技术 摘要:介绍了桉树的地理分布、植物学特性、生长环境和经济价值。论述了桉树组培的意义和国内外的研究发展史；目前已有了比较成熟的培养技术，并已在大量的生产应用。在组培的技术方面，通过对桉树组培苗进行研究几生产实践过程,总结出了桉树从瓶苗培育成商品苗的技术过程。比较详细的论述了桉树从初代培养的取样、材料的灭菌、接种、培养和培养基的配方；继代中的接种方法、培养基和培养条件；生根培养中的培养基的配方、接种方法和培养和条件；育苗中的炼苗、基质的准备、移栽和育苗过程中各种管理措施等。 关键词: 桉树 组织培养　无菌苗 继代 生根 移栽 管理 前言 1.1 分类及地理分布 桉树是桃金娘科桉属植物的总称,自然分别于澳大利亚及华莱士线以东的澳洲大陆附近的太平洋岛屿。从十八世纪以来,不少国家和地区就开始引种驯化,我国华南、西南和华东南地区也广泛引种栽培。近年来,各地都在大力发展,先已在广东、广西、海南、四川、云南等省形成一定规模,产生了的生态和经济效益。桉树种类繁多,据近代桉树分类学家Blakeln的分类,有602种,其中重要经济用材树种约100种,被广泛栽培的有40余种,主要有蓝桉、赤桉、巨桉、细叶桉、斑皮桉、柠檬桉、多枝桉等。 1.2 经济价值及生产中的问题 桉树是当今世界三大速生树种之一,已成为我国大面积造林和“四旁”植树的主要树种。它的显著特点是:① 材质坚硬,材、皮、叶、花的经济价值都很高,既是用材林、经济林、防护林、风景林，又是很好的能能源树种；②繁殖容易，速生丰产，特别是幼林期生长快，大大缩短了生长周期，大而获得较高的经济效益；③种类多，抗逆性强，既有耐热品种，也有耐寒品种，病虫害少，较耐用品瘦瘠，要在不同气候带栽种，深受群众喜爱。桉树的木材是造纸、坑木、造船等良材，叶子可提油料，树皮可提树脂，残渣培养食用菌后还可当肥料，花是良好蜜源。 桉树是异花授粉植物，有性繁殖很容易引起变异，很难保持物种的优良性状，无性繁殖如扦插等繁殖得很慢，无法满足生产的需要。而桉树组培快繁可使桉树保持其遗传稳定性，其繁殖系数大，一年内一个桉树带节茎段，可以繁育百万株以上的苗木。 1.3 简史及研究进展 桉树组培始于60年代中期。1965年，Susses首次报道从赤桉实生苗外植体获得愈伤组织。Anneja等（1969）由柠檬桉木质块茎的愈伤组织诱导出小植株。Cresswell等（1974）用巨桉(E.grandis)幼苗的切节进行培养，并主要报道了切节培养根发育的解剖研究；次年，Cresswell等人继续用14节以上的巨桉分枝培养，将外植体浸泡2h以除去抑制剂，结果有30%的切节腋萌发并启动根的发育。De.Fossard等（1976）将该方法扩大应用到美丽花桉（E.ficifolia）成年树，其中有些切节的培养体产生了丛芽，但在成年组织上未能生根。Ecluado等研究了柠檬桉的组培快繁技术，并于1981年用成年柠檬桉嫩枝切段培养成功获得完整植株，由成年树的一个芽在一年内可获得10万株树苗。1981年，S.Kondas报道由一棵20年生的杂种桉树成功地培养出芽 。 我国的桉树组培工作起步较晚，但进展较快。自1978年起，广西.广东.上海等地才开始建立实验室并进行试验研究。庄长茂（1980）对上海植物引种栽培的12种桉树进行了离体培养试验，其中葡萄桉.灰桉（E.cinerea）.王桉（E.reghans）和柠檬桉均获得大量苗木（据欧阳权、.彭海忠，1986）。1981年，谢绮文等人对雷林一号桉优良树种进行离体培养获得了完整植株并移栽到苗圃。广西钦州地区林科所（1979）由雷林一号桉、柠檬桉、窿缘桉嫩茎和萌条顶诱导出丛生型绿芽，经转移后获得完整植株并移栽成活，并在此研究基础上用雷林一号桉优树种子及无菌苗诱导，分化出根苗齐全的胚状体苗，随后又从柳窿（柳桉ⅹ窿缘桉）和巨窿（巨桉X窿缘桉）F1杂交种子诱导出丛生绿苗。广西林科所1981年也成功地实现了柳窿F1的组培快繁，并移栽成活和上山造林。1992年，邱运亮和阚文靖等成功地由赤桉的腋芽、茎尖、茎段、下胚轴等外植体再生出完整植株并移栽成活。刘国民等1996年比较系统地研究了不同基本培养基、不同激素条件对赤桉愈伤组织形成的影响以及外植体种类和激素条件对丛生芽分化的影响，获得了完整植株，移栽成活并定植于大田。 桉树组织培养技术 桉树组织培养成苗途径有：由愈伤组织分化成苗，从顶芽和腋芽发育成苗，用胚性细胞诱导成苗。本文介绍的是从顶芽和腋芽发育成苗的技术过程。 2.1 概述 桉树顶芽和腋芽在离体培养中均可被诱导发育成苗，单芽可萌生出单一的或多个苗。将新形成的芽切割下来，使之再萌生出新的苗或丛生芽，将2-3cm的芽或茎段（带1~2个节）切割