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抗合成聚合材料抗菌防黴效力测定.doc
抗合成聚合材料抗菌防霉效力的测定
广东省微生物分析检测中心
抗合成聚合材料是指合成聚合材料在生产或后加工过程中添加抗菌仿佛物质或结构经特殊处理具有抗菌防腐性能的一种特殊合成聚合材料。目前主要产品有抗菌TF、PE、PF、PP、PVC、CA系列等,用于家用电器、食品包装材料、卫生用品、电缆、胶片等正愈来愈热,该制品的特殊质量指标即抗菌防腐能力如何测定,国外研究较早,提出了一些相关的评价试验方法,我国对这类拒水性的制品尚未有相应的行业指标和标准试验方法,近年来,根据市场的需求和摸索的一些经验,介绍如下
细菌增殖阻止效果振荡瓶法
1.1试验菌株
大肠杆菌Escherichia coli (ATCC8739)
金黄色葡萄球菌 Staphyloccus aureus (ATCC6538)
肺炎杆菌Klebsiella pneumoniae (中国药检所 46101)
枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis (ATCC 9372)
1.2培养基
营养肉汤:
1/20营养肉汤:将营养肉汤配好后用蒸馏水稀释20倍;
营养琼脂;
以上培养基均在0.1Mpa下 蒸汽高压灭菌15分钟。
3仪器和设备
普通微生物实验室常规仪器设备。
4式样的准备
将待测样品尽量剪碎,称取0.95±0.05 g为一份,灭菌备用,灭菌方法根据不同材料而定,耐高温的可在0.075 Mpa高压蒸汽灭菌 15分钟,不耐高温的可用不破坏该结构的消毒水或75%乙醇进行消毒;将与待测样品结构相同而未经抗菌处理的样品作为对照试样,与待测样做同样的处理。
5试验菌液的制备
将供试菌株,分别转接入营养肉汤,置37℃振荡培养18小时,用血球计数板计数菌液浓度,然后用1/20营养肉汤进行一系列稀释至1×105 ~2×105cells/mL,备用。
6测试步骤
在250 mL三角瓶中加入1/20营养肉汤100mL,移取5 mL试验菌液加入上述三角瓶中,使瓶中含菌量为1×104 ~2×104cells/mL,采用稀释平板法测定振荡前瓶中的菌浓度。再向瓶中加入试样,37℃,120转/分振荡6~12小时,使试样和试验菌强行接触,振荡后稀释平板法测定三角瓶中的活菌数。
7结果计算:
细菌减少率%=(A-B)/A×100%
式中:A—振荡前(接种后,加入试样 前)三角瓶中的菌液浓度;
B——振荡培养后试样三角瓶中的菌液浓度。
设空白对照(不加试样的震荡培养)四个供试菌减少率的平均值为X,试样四个供试菌的减少率平均值为Y,当X〈Y时,可判定细菌的增殖被抑制。
真菌生长繁殖阻止效果试验法
1供试菌株
白色念珠菌 Candida albicans (ATCC10231)
2.2培养基和试剂
察氏琼脂培养基 0.1Mpa蒸汽灭菌15分钟。
0.03mol/L磷酸盐缓冲液:Na2HPO4 2.84g, KH2PO4 1.36g,蒸馏水1000 mL,pH为7.2~7.4,0.1Mpa蒸汽灭菌15分钟,使用时以蒸馏水稀释100倍。
2.3试样的准备
处理同1.4
2.4试验菌液的制备
将新鲜培养的斜面菌种用灭菌磷酸盐缓冲液洗下,计数,并稀释到105cells/mL,备用。
2.5测试步骤
在250 mL三角瓶中加入磷酸盐缓冲液100 mL,移取5 mL试验菌液加入该三角瓶中,混匀,稀释平板法测定振荡前的活菌数(用察氏琼脂培养基,30℃培养3天),将这个活菌数计为A,再向瓶中加入1.00克试样,30℃振荡培养1小时(240转/分,振幅12厘米)。振荡培养后,稀释平板法测定活菌数,该活菌数为B,空白和对照样同样振荡培养,振荡后测定活菌数空白为C,对照样为D。
2.6结果计算
真菌减少率%=(A-B)/A ×100%
当︱(A-C)/A︱×100〈10和︱(A-D)/A︱×100〈30时,试验结果有效。
防霉性能测定法
1供试菌株
黑曲霉Aspergillus niger(ATCC9642)
绳状青霉Penicillium funiculosum(ATCC9644)
球毛壳霉Chaetomium globosum(ATCC6205)
绿粘帚霉Gliocladium virens(ATCC9645)
出芽短梗霉Aureobasidium pullulans(ATCC9348)
3.2培养基和试剂
营养盐溶液:KH2PO4 0.7g
MgSO4.7H2O 0.7g
NH4NO3 1.0g
NaCL 0.005g
FeSO4.7H2O 0.002g
ZnSO4.7H2O 0.002g
MnSO4.7H2O 0.001g
将上述组分溶于1000 mL蒸馏水中,用0.01mol
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