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临床生化检验 第一节 检验流程及相关重点知识 参考书：本次培训班教材， 教学方式：示教、操作、提问、讲解等。 总学时：90min 一、分析前（20m） （一）、标本采集与送检（参考书籍：检验本科教材：《临床检验基础》） 1、标本管（分离胶）的选择 真空采血管一种真空负压的采血管，根据帽子的颜色不同来进行区分。 ② 一次多管采血顺序 2、及时送检： 血标本尽可能在采血后一小时内分离血清，否则会引起血糖分解及细胞内成分释放（如K）而影响检测结果。 （二）、标本接受与处理 1、样本条码与双工 双工是指通信允许数据在两个方向上同时传输，它在能力上相当于两个单工通信方式的结合。是通讯传输的一个术语单工就是在只允许甲方向乙方传送信息，而乙方不能向甲方传送 2、标本分离：样本量、标本放置时间与孵育、离心转速与时间、高凝标本处理 3、标本拒收 对不符合检验要求的样本要及时登记并联系临床科室。 （三）样本保存 血清标本一般4～8℃可保存7天（加盖），未加盖标本4～8℃可保存72小时。 （四）生物安全 二、分析中（30m） （一）电源：配备UPS（1小时） （二）仪器清洗用水：去离子水（ 合格标准：电阻(10m(.cm）。 （三）分析参数设置（参考书籍：城乡对口支援《实习指导》） 1、方法（EP/RATE） 2、校准（方法、时间） 3、试剂（R1、R2） 4、波长：多采用双波长以去除标本内源性物质（如脂血、溶血、黄疸）等干扰。 5、线性范围与复查 6、反应方向 （四）检测系统建立与检测性能评估（参考书籍：冯仁丰主编《临床检验管理技术基础》） （五）校准：校准品选择与定值、校准品使用、校准频率，校准方法 1、校准品选择与定值 校准物的选择尽可能选择配套仪器/试剂厂家校准品，非配套校准品应选择人血清为基质，其定值应与所选试剂盒检测方法一致（校准品定值随方法而异），最好与标准检测系统进行比对。 2、校准频率 校准及校准确认时间：至少每6个月一次以及发生以下任一个情况： ① 进行了主要的预防性保养、或调换了关键的零部件，可能会影响检测的性能。 ② 更换试剂批号。除非实验室能核实，试剂批号的改变不影响报告患者检测结果的范围，室内质控也不受试剂批号改变的任何影响。 ③ 室内质控出现了不寻常的趋势或漂移；或超出了实验室可接受限。 应注意的是：不能由用户校准、以因子校准的检测系统，实验室对校准的核实负有责任。 （六）、室内质控：质控品选择与定值、质控品使用、质控频率、质控图分析与失控处理 （参考书籍：冯仁峰主编《临床检验管理技术基础》或王治国主编《临床检验质量控制技术》） 1、质量分析目标的确立 一般应根据临床要求、当前检测技术水平、行业要求及实验室条件确定质量分析目标，即总误差（TEa%），可选用卫生部临床检验中心室间质评标准作为分析目标，允许的不精密度（cv%）应小于TEa%/3或采用6Σ（SIigma）规则进行评估。 卫生部临床检验中心室间质评质量标准 2、质控品的使用 3、质控规范 IFCC规定：实验室对每项测试实验室最少每天使用1个水平质控品检测1次。如果每天的患者标本数超过25个，至少检测2个水平的质控品。若每天的患者标本数超过75个，实验室应当做2次质控，每次检测2个水平。如果实验室有更大的工作量，则每个分析批都必须带一个质控样本。 实验室应当具备一套程序，以减少在失控情况下报告显著差异或异常的患者检测结果的风险。首先，一旦触犯质控规则，应当拒绝检测结果，并在问题被纠正且性能经确认合格后复检相关患者样本。实验室还应当对自上次质控在控之后检测的患者样本结果进行评估。其次， 应当定期审核质控数据以发现检测系统中的趋势性变化，后者可能提示检测系统存在问题。一旦发现这些趋势性变化，应当采取预防性措施并予以记录。再者，应当尽可能建立统计学方法（如L-J图）和使用过程控制规则以持续监控检测系统的性能 4、室内质控图的绘制 （七）失控处理 （八）样本检测 三、分析后（20m） （一）报告单格式及要求：特别注意样本说明 （二）结果审核与报告：质控在控，考虑临床诊断、历史结果，异常结果的复查，标本干扰（溶血、脂血、黄疸、药物、输液、输血、抗凝），临床联系沟通 标本状态对检验结果的影响（溶血、黄疸、脂血） 标本状态（内源性干扰）干扰检测结果原因主要有以下三个方面：待测物质在细胞内浓度明显高于细胞外如K、P、LDH、AST等；细胞内释放的成分可作为待测反应的底物或产物如溶血对CK或CKMB测定的影响可因血清ATP、腺苷激酶（AK）、葡萄糖-6-磷酸（G-6-PD）增高干扰其反应进程使得测定结果偏高；HGB（溶血）、BIL（黄疸）、脂蛋白颗粒（脂血）等由于其光吸收而干扰待测物质光吸收性质。 2、药物对检验结果的影响 3、输液对检验结果的影响 输液对检