鸡EX-FABP基因单核苷酸多态性及其和部分性状的关联研究.pdfVIP

Ⅱ．家禽遗传育种 鸡EX-FABP基因单核苷酸多态性及其与 部分性状的关联研究 周 琼’ 廖菁 陆 健 王存波 雷黎丽 常国斌” 陈国宏 (扬州大学动物科学与技术学院，扬州225009) 摘要：细胞外脂肪酸结合蛋白对脂肪沉积有着重要影响，是研究鸡脂肪沉积的重要候选基因。 本研究以安卡鸡、如皋草鸡和文昌鸡为试验材料，采用PCR—SSCP技术对该基因的3个外显子及部分 内含子进行单核苷酸多态性及其对部分性状的遗传效应进行分析。结果表明，在外显子均没有检测到 基因型差异不显著，文昌鸡BB型与CC型差异显著。BB型在3个鸡种中的肌内脂肪含量均最高，可 见内含子3的SNP在不同的鸡种中的遗传效应是不一致的．但均揭示BB型可能对肌内脂肪沉积有重 要的影响。 关键词：细胞外脂肪酸结合蛋白(EX-FABP)；单核苷酸多态性；鸡；肌内脂肪 近半个世纪以来，家禽业取得了飞速的进展，尤其是肉鸡的生长速度得到了前所未有的提高。然 而随着人们生活水平的提高以及营养、保健意识的增强，人们对鸡肉的需求已不仅仅局限在其量上， 对肉质的要求也越来越高，肉鸡的消费正在由数量型逐渐向质量型过度。从国内外家禽产业的发展趋 势分析，优质肉鸡将逐渐占领国内外肉鸡市场，因此，改善肉鸡的肉质已成为肉鸡育种工作者的新 目标‘1。3|。 许多研究表明，不同畜种间肉品的特征性香味主要来源于脂肪，肉中脂肪分肌间和肌内脂肪，前 者主要成分是甘油三酯，其含量多寡与肌肉的多汁性、大理石纹样等有关，后者则是磷脂，主要由总 磷脂组成【4】，因富含不饱和脂肪酸特别是长链不饱和脂肪酸，极易被氧化，其氧化产物直接影响肉 acid 克隆并测序了鸡的EX-FABP(extraceUular fatty bindingprotein)基因，其核苷酸序列全长 5 148bp，包括2 氨基酸。叶满红【_刊等对不同鸡品种间肌内脂肪沉积差异与心脏型、脂肪型脂肪酸结合蛋白基因的关 结果表明这些等位基因与肌内脂肪沉积有关。仇雪梅旧1等对不同鸡品种间腹脂性状差异与EX·FABP ·作者简介：周琼(1985～ 163．tom )，男，副教授，硕士生导师，主要从事动物遗传育种与繁殖研究，E—mail： 一通讯作者：常国斌(1976一 passioncgb@163．com 175 中国家禽科学研究进展 在显著相关。本试验以EX—FABP基因作为鸡肌内脂肪含量性状的候选基因，旨在探讨Ex—FABP基因 能否作为鸡肌内脂肪含量的候选基因，为家禽标记辅助选择提供理论依据。 1材料与方法 1．1实验动物 从中国农业科学院家禽研究所国家地方禽种资源基因库中，抽取12周龄安卡鸡67只，如皋草鸡 85只，文昌鸡70只。翅静脉采血0，5mL，肝素钠抗凝，加裂解液5mL，用酚-氯仿抽提法提取基因 肝重(g)，同时采用索氏抽提法测定胸肌中肌内脂肪含量(％)。 ． 1．2 引物设计 Premier5．0及 6．0软件设计引物，扩增外显子3、外显子5、外显子6及部分内含子。引物由上海生工生物工 Ohgo 程技术服务有限公司合成。所用的引物序列及相关信息见表1。 表1 PCR扩增所用的引物序列、位置及PCR产物长度 1．3 PCR扩增 each dNTP，1．5mmol／L 扩增反应总体积为25txL，其中包括：10×buffer缓冲液，200斗mol／L MgCl2，引物浓度为1．0p．mol／L，1UTaq 保温。PCR产物在1％琼脂