肌注与基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠体内的动态分布的比较研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 肉注射免疫BALB／cd、鼠，免疫组化定量分析的结果表明，基因枪轰击比肌肉注射表达水平高。Haim 等将耶尔森氏菌属PestisF1抗原核酸疫苗通过肌肉注射200 pg／．q和基因枪轰击0．5弘g／只免疫小鼠 时发现基因枪免疫剂量虽然只有肌肉注射免疫量的1／400，但第三次基因枪轰击免疫后产生的抗体滴 d可以被检测到产，持续表达的最长时间为4 早在3hl／P可检测到表达产物的存在，且持续时间可持续9wk，而表达产物的量也比肌肉注射的多。 对小鼠进行基因枪免疫，就可以产生很好的免疫效果。这些都提示从基因疫苗的使用量和产生的免 疫效果来看，基因枪是优肌肉注射的免疫方式。 本实验中通过基因枪免疫的剂量是肌肉注射的剂量的1／200．3／25，但基因疫苗最早表达时间、持 续时间和表达产物的量均优于肌肉注射，分析原因可能有以下几点：(1)皮肤特殊的组织结构。首 先皮肤中含有丰富的朗氏细胞、树突状细胞，这些细胞是专职的抗原提呈细胞(APC)，外源质粒 DNA被导入后能快速的被APC吞噬并在其中表达(2)包裹基因疫苗的金颗粒的具有特殊的规格(直 径一般在0．5_o．9岬之间)，远小于细胞，这样基因枪通过高压气体轰击动物时，许多基因疫苗有可 能直接被导入到细胞中，降低了被动物机体内酶降解的机率，减少了基因疫苗的损失，同时即便金 颗粒载体只被导入到细胞间，也可能诱导皮下的APC对其的吞噬，进一步增加基因疫苗了进入细胞 的概率，有利于基因疫苗的表达。(3)肌肉组织的特殊结构。包裹肌肉纤维的大量结缔组织是基因 疫苗进入肌细胞的巨大阻碍，虽然肌注的量较大，但只有约10／o-2％基因疫苗能够被转染。基于上述 几点，基因枪很小的基因疫苗用量就能产生优于较大剂量肌肉注射的免疫效果。 u∥只) 疫剂量与其在组织中的含量和表达有一定的正相关性，肌肉注射基因疫苗的剂量越大，相应的基因 对于剂量的依赖性不如肌肉注射明显，相对于肌肉注射，基因枪介导的免疫在基因疫苗的使用量上 要小的多，很小的剂量就可产生较大肌肉注射剂量所产生的免疫效果甚至更好，导致基因疫苗通过 基因枪免疫后在组织中的含量和表达的剂量依赖性相对于肌肉注射就显得较弱。 参考文献(12篇，作者略) 肌注和基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠体内的动态分布的比较研究 刘晓东L2，程安春1鼬’，汪铭书12≯，韩新锋L2，卢菲L2，黎敏L2，陈孝跃1．2 (1．四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心，四川雅安625014；2．动物疫病与人类健康四川省 gg肌 Pg、100lag、50 肉注射和6Pg、3 对照，于免疫后不同时间采取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和免疫部位肌肉．应用荧光定量PCR ,,qra,J 后l-3 h后可分布至小鼠体内各组织器官中且含量达到最大，随后含量下降，但仍能持续存在31wk以 15 5 wk前差异显著(P0．05)，但l 中，基因疫苗的剂量和基因疫苗在组织中的含量呈现较弱的正相关性，各剂量之间差异不显著(PO．05)． 通讯作者l程安春。汪铭书1rI也：0835—2885774，E-mail：chenganchun@vip．163．com 2lO 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 达到最大含量，之后含量下降，但较长时间后(31wk)仍能在组织中检测到有一定含量． 关键词：小鹅瘟病毒vp3基因疫苗：荧光定量PCR；肌肉注射；基因枪轰击；动态分布 PCRdetectsthe distributionof Fluorescent GP弘纪3 quantitative dynamic