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用蜂毒溶血肽和表皮生长因子构建膜毒性免疫毒素的研究.pdf
农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (3): 390~394
·研究论文 ·
用蜂毒溶血肽和表皮生长 因子构建膜毒性免疫毒素 *
1,2 , 1 **, 1 , 1 , 3 , 1 , 1 , 1 , 1
牛 冬 阮 晖 潘冰青 王金玲 吴 德 陈美龄 张佳佳 陈启和 何国庆
1. 310029 2. 310029
( 浙江大学生物系统工程与食品科学学院 , 杭州 ; 浙江大学动物科学学 院, 杭州 ;
3.浙江金华省级高新技术园区 , 金华 321017)
摘要:表 皮生长 因子受体由于在许多种肿瘤细胞表面过度表达而成为特异杀伤肿瘤细胞 的理想靶位 ; 正 电性抗菌肽有独
特的膜毒性细胞毒机制 。研究 以小鼠 ( , 以蜂毒
( ) mouseepidermal growth factor MEGF)
表皮生长 因子 , 为导 向部分
(melittin Mel) MEGFMEL
溶血肽 , 为毒性部分 , 构建特异杀伤肿瘤细胞 的膜毒性免疫毒素 嵌合蛋 白。该嵌合蛋 白以大肠杆菌
( )BL21为表达宿主 , 以 pET30a 为表达载体 , 采用低温诱导表达和无破胞程序 的冻融法进行纯化 , 最终浓度为
,
63.45 g/mL、 纯度为 68%。体外活性检测表 明 MEGFMEL嵌合蛋 白对表面过度表达 EGFR 的肝癌 A 细胞表现 出显著杀伤
滋 431
,其 (
力 为 52.6 g/mL。结果显示 以正 电性抗菌肽为毒性部分构建针对表皮生长 因子受体 的新 型膜毒性免疫毒素 im
50 滋
munotoxin IT 。
, ) 是可行的
: ; 蜂毒溶血肽; 表皮生长因子受体
关键词 膜毒性免疫毒素
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