一)液相色谱基础-0904.pdfVIP

戴安中国HPLC用户培训 2009年 戴安中国有限公司 美国戴安公司 美国戴安公司 美国戴安公司 美国戴安公司 液相色谱基础知识 液相色谱基础知识 戴安中国有限公司 色谱的发明人 • 俄国科学家：M. S. Tswett • 正式命名“色谱”的文 献 经典液相色谱 一、色谱起源 石油醚 色素 碳酸钙颗粒 玻璃柱 色谱法简介 • 色谱法（Chromatography ）溯源 • 俄国科学加1903年发现色谱的吸附原理，开创 了应用吸附原理分离植物色素的新方法并见诸 于俄文的文献 • 1906年正式命名（见诸文献） • 色谱法；Chromatography • 50年代开始广泛研究和应用 • 主要是气相色谱及薄层色谱 • 高效液相色谱法的广泛应用始于70年代 HPLC技术的发展过程 HPLC是经典液相色谱的发展，同时是气相 色谱理论的扩展和延伸。 二十世纪60年代末期生产出商品化液相色谱 仪，其发展非常快速，经过30多年的努力已 成为分离学科中的骨干技术。 目前，HPLC技术已趋于成熟。 HPLC技术的发展 高速化、高效化 高精度的高压泵、能走梯度洗脱； 高灵敏度的检测器、紫外/可见光检测器（检测限10-9 g)荧光检测器（检测限10-12 g)，示差、电导、电化学 以及蒸发光散射检测器还有流动放射性等。 微粒硅胶为LC发展奠定了基础，现在的填料粒度大多 为10 μ、5 μ，甚至3 μ、2 μ，填料的微粒化产生了 快速柱，微粒柱提高了分离效率和分析速度。 键合相填料的出现拓宽了LC在多领域的实用能力。 微径柱，毛细管柱，Nano柱提高灵敏度和分离效率 HPLC技术的发展 自动化、智能化 由色谱工作站单点控制泵、自动进样器、检测器 的操作程序并作色谱数据处理和光谱信息处理， 从而实现24小时无人操作。 二极管阵列检测器的作用可在色谱分析的同 时作光谱确认 HPLC与质谱、核磁共振谱、红外光谱仪的 联用技术 HPLC的发展趋势 新型固定相-C22,C30加长链；多硅烷化试剂；高密度键合； 立体键合；静电屏蔽 整体柱-高分子键合（引发剂+单体聚合） 毛细管/纳流（Nano LC）-高分离度(Dionex) 多维色谱-复杂组分分离(Dionex) 双梯度泵双柱切换-高通量(Dionex) 超高压HPLC-快速:UPLC(Waters),RSLC(Dionex) 超高温流动相（热水）-新型柱：石墨碳黑等 色谱分离的机理 色谱是一种分离技术 色谱分离是一个物理过程 流动相（Mobile Phase ） 固定相（Stationary Phase ） 样品（溶解于流动相中的溶质） 液相色谱分离机理 高效液相色谱是一种以液体作流动相和固体微粒 作固定相，待测组分在柱内的两相之间进行高速分配 和高效分离的柱液体色谱方法。