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液相色谱基础知识 HPLC与UPLC Waters Solution Center 袁汉成 Han_cheng_yuan@ 010 ©2011 Waters Corporation 1 沃特世科技(上海)有限公司 北京代表处 通讯地址：北京朝阳区光华路15号院2号铜牛国际大厦9层 邮政编码: 100026 电话：010北京实验室,袁汉成) 传真：010 Waters公司网址 个人邮箱: han_cheng_yuan@ ©2011 Waters Corporation 2 什么是色谱? 色谱法的简称 (又叫色层法,层析法),其本质是一种 分离分析方法 常见的分离方法 — 蒸馏 — 离心 — 电泳 — 过滤 — 超滤 色谱 目前最有效的分离方法 ©2011 Waters Corporation 3 色谱法简介 色谱法(Chromatography)溯源 – 100多年前俄国植物学家Tswett(茨维特)分离植物色 素时采用的实验方法 – 他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直 立玻璃管,再加入石油醚使其自由流下,结果色素中 各组份互相分离形成各种不同颜色的谱带 – Tswett用希腊语chroma (色)和graphos (谱)描述他 的实验方法，即现在的Chromatography (色谱法) ©2011 Waters Corporation 4 Tswett 的实验 •一根长玻璃管填充碳酸钙的 颗粒 •将碾碎之植物叶片的提取液 灌入柱中 •随着石油醚提取液向下流过 柱子，现出展宽的色带 •分离出不同的化合物 Chromato -- 颜色 Graphy -- 图像 注: Tswett：俄文( цвет)的意思是颜色 ©2011 Waters Corporation 5 色谱法简介 色谱法是一种现代的分离方法 -不单是分离有色物质 -不单是吸附机理 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代 ©2011 Waters Corporation 6 色谱法原理 色谱法的原理 – 是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分