长白猪精原细胞的分离和纯化.pdfVIP

第 33 卷 　第 6 期 解 　剖 　学 　报 Vol33 ,No6 2002 年 12 月 ACTA ANATOMICA SINICA Dec . 2002 长白猪精原细胞的分离和纯化 俞作仁 　孙晓冬 　关纪奎 　薛社普 　韩代书 ( 中国医学科学院基础医学研究所 　中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系 ,北京 　100005) 　　[摘要] 　目的　分离和纯化猪的精原细胞 ,从而对与人类具有高同源性的猪的精子发生进行研究 。　方法 　 ( ) 酶消化法制备 2 月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液 , 以2 %～4 %牛血清 白蛋白 BSA 连续梯度作为分离介 质 ,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞 。　结果 　重力沉降法分离细胞后所获精原细胞纯 度为 91 % ,进一步经过贴壁培养纯化后 ,精原细胞纯度达到 942 % 。　结论 　该方法方便 、快捷 ,分离效果好 ,能满 足在分子水平研究精原细胞的需要 。 [ 关键词] 　精原细胞 ;分离 ;猪 ;睾丸 + ( ) [ 中图分类号] 　S8651 301 　[文献标识码] 　A 　[文章编号] 2002 06662 SEPARATION AND PURIFICATION OF SPERMATO GONIA FROM CHANGBAI BOAR TESTIS YU Zuoren , SUN Xiaodong , GUAN Jikui , XUE Shepu , HAN Daishu ( Dep artment of Cell biology , Institute of B asic Medical Sciences , Chinese Academy of Medical Sciences , ) School of B asic Medicine , Peking Union Medical College , Beij ing 　100005 , China [ Abstract ] 　Objective 　To isolate and purify spermatogonia from 2monthold Changbai boar testis. Methods 　After enz ymatic digestions of boar testis , the suspension passed the 2 %4 % BSA continuous gradient medium in a gravity unit by velocity sedimentation. Then the spermatogonia were further purified by attachment culture . Results