葡萄与葡萄酒中花色素苷分离和鉴定方法.pdfVIP

维普资讯 l l【】外葡萄与葡萄酒 200日．2 $INO．OVERSEASGRAPEVINE＆WINE 离和鉴定方法 邵建辉 (山东省威海职业学院，威海 26421I) 花色素苷是葡萄 与葡萄酒中 PolycarATC聚乙烯吡咯烷酮柱 脱掉糖和其它极性物质，花色素苷 重要的多酚类物质，是构成葡萄与 (PVP，PolyVinylpyrrolidone，150 用酸性甲醇 (0．1％HC1)洗脱，再 葡萄酒颜色的重要组分i”。研究葡 ×25mmI．D．)、BioGelP一2柱 (450 真空浓缩溶于少量水中。水溶性初 萄与葡萄酒任成长与成熟过程中 x25mm I．D．)、葡聚糖凝胶柱 步分离液用制备HPLC进一步纯 花色素苷的变化具有苇要意义，其 SephadexG一25~HSephadexLH。20。 化。梯度洗脱液为10％乙酸和甲 中花色素苷提取、分离和鉴定方法 还町用AmberliteXDA一7树脂柱浓 醇，流最6ml／min，520nm检测，然 是进行研究的关键。有关花色素苷 缩、再纯化 。 后收集各馏分。制备HPLC需要进 的提取方法，王华等已对此进行了 用盐酸洗脱PVP柱，可以把花 行两次纯化，并采用不同的色谱柱 详细报道2【】。因此本文主要对花色 色素类与黄酮醇类分离开来。游 和梯度洗脱液，用5％乙酸和甲醇， 素苷的分离纯化和鉴定进行总结 离花色素的洗脱顺序依次为： 二 流量 15ml／min，280nm检测。收集 和探讨，为葡萄与葡萄酒花色素苷 }T{花翠素}T{基花青素天竺葵 的馏分转移到水溶液中，冻干。冻 的研究提供依据。 素3 一甲花掣素花青素花 干的纯花色素苷用HPLC／DAD检 1花色素苷分离纯化方法 犁素f。 测纯度 1。 花色素苷分离纯化的方法主 MichaelSchwarz等Hillebrand 花色素苷的纯化还可采用膜 要有纸层析 (PC)、薄层层析 用AmberliteXAD一7提取和分离 分离技术。利用各种类型的超滤膜 (TLC)、柱层析 (CC)和高敛液相 葡萄酒花色素苷 ，树脂柱里充满甲 和反渗透膜对色素进行过滤和纯 色谱法 (HPLC)等。 醇：水 (1：1)混合液，使用前先用 化 ，也可使用超滤醋酸纤维素膜纯 纸层析以水系溶液作为展开 甲醇清洗，再用水彻底清洗。待分 化和浓缩 。 剂，并可结合使用不同组成和比例 离葡萄酒试样先用水洗去糖、有机 2花色素苷鉴定方法 的展开剂l3l。通常用新华NO。3和 酸、蛋白和盐。含有花色素苷的多 2．1PC法 WhatmanNO．3层析纸。方法简单， 酚化合物仍留在树脂柱里，然后用 PC法在20tH=纪40年代广泛使 但耗时长。 甲醇：乙酸 (19：1，v／v)洗脱。真 用，目前不常用。通过样品在3～ 薄层层析所用支持剂为硅胶 空蒸发甲醇，水相冻干 (含花色素 aM不同展开剂的Rf值与标准Rf值 或微晶纤维等。花色素衍生物与硅 苷)。除去其它无色的多酚，可以 对照，来粗略鉴定所含花色素苷的 胶所含的微量金属形成的络合物 用乙酸乙酯萃取，这个操作可以在 种类 。 能延缓儿茶酚衍生色素(如花青素 XAD一7浓缩之前或之后进行。 2．2光谱分析法 和花翠素)的移动。纤维素薄层表 F．J．Herediat等用甲醇：盐酸 2．2．1紫外一可见光谱法(uV．VIS) 面积大，颗粒细，具有速度快，分 (95：5，v／v；HCI=IN)提取红葡萄 根据花色素苷在 420nm、 辨率好的优点 【。 中的花色素苷 ，真空浓缩去掉 甲 柱层析的填料为氧化铝、吸附 醇，剩余物溶于水中，用正己烷去 树脂(阳离子交换树脂或甲醛酚醛 除脂溶性物质，水溶性物质浓缩； 色素苷。 树脂 )、聚酰胺或凝胶等