血栓性小板减少性紫癜病人血浆中血小板聚集蛋白的提纯和部分性质.pdfVIP

中华医学杂志1989年瓣69卷第 7划 血栓性 小板减少性紫癜病人血浆中 血小板聚集蛋 白的提纯和部分性质 上海医科大 学 中 山 医 院血 液 科 陈松 鹤 美国迈阿密大学医学院血棱病 中心 连俊 一 牛围科学院上海生物化 学 研 究 所 张 厦 上海第二医 科 大 学 医 学 拴 验 系 展哨 霞 提要 从一名活动期血栓性血小扳磕少性紫瘕病^血浆中发现井提 纯得捌一种 分子量 为 59O00U的 血小板聚葵蛋白，对它的性质和作用进行了韧步探讨 关铺词 血，J、板减少性紫瘴 血小板凝集 血小板 诊断 ．实验室 血栓性血小扳减少 性 紫 癜 (Thrombotic 和少含血小板血浆 (PPP)。用Walsh[ 的方法 tnrombocytopenl~purpuraTTP)，是一种 以 制备洗涤血小板 ，悬于 Tyrod~s液 (不含氯化 微血管性溶血性贫血、血小板减少、肾脏损害、 钙)。PRP中血小板浓度校正在 250×10。／L， 神经系统症状和发热为主要特征 的综合征 。发 洗涤 的血小板浓度校正在 1000×10／L。 病机理至夸 尚束清楚 近年来 ，一 些 观 察 表 血小板聚集试验在Chronolog聚集仪上进 明，TTP血浆或血清能引起 自身或正常人血小 行，血小板的聚集活性以1O分钟内光密度减低 板聚集 ／凝集 ，提示血浆 中含 有引起血小 的最大程度 ( )表示。当光密度降低在10 以 板聚集 ／凝集 的刺激 因子 。我们在 1例 TTP活 上，同时显微镜下观察到血小板凝块 ，确定为聚 动期病人血浆 中发现井提纯得到了一种分子量 集活性 阳性。在对洗涤血小板 的作用进行溯定 为 59000u 的新 的血小板聚集蛋 白 (Platelet 时，取0．3mlTTP血浆或提取物与纤雏蛋 白原 aggregatingprotein，PAP)，对 它 的性质和 (终浓度0．2mg／m1)及氯化钙f终浓度0．5mol／L) 作用进行了初步探讨。 混合。总体积0，4m|．加人0．1m|洗涤 血小板 悬液 ，记录光密度改变 在对PItP作用进行溯 材料和方法 定时，将0．1m!各提取物加入到0．4mlPRP中， TTP血浆 由美国迈阿密大学医学院提供 ， 记录结果 。 一 7O。c冷藏 。用作提纯PAP的血浆来 自一 名 在研究某些抑制物对PAP的作用时，PAP 女性病人 。该病人1985年在 Jackson纪念 医院 (终浓度 12~g／m|)与来 自正常人或同一病人恢 住院，并被确诊为血栓性血小板减少性紫癜 ， 复期血浆 ，37~C温育60分钟 ，或与凝血酶抑制剂 经血浆置换等治疗后病情好转，出院詹来再复 作用后 ，加入纤维蛋 白原，氯化钙 ，总体积为 发。其血浆分别取于活动期治疗前和恢复出院 0．4ml，随后加入0．1ml洗涤血小板悬浪 ，记录 后。其它血浆分别来源于弥漫性血管内凝血、 光密度变化 。在研究中，0．1ml血小板悬液与 特发性血小板减少性紫癜病人及健康成人。 血小板抑制剂，纤维蛋 白原、氯化钙混合后， 血小板 由健康志愿者提供，用 3．8 枸橼 总体积为0．5m|，在37。c预温 5分钟后 ，加入 酸钠抗凝，离心后制备富含血小板血浆 (PRP)