宝石斑体内蛋白酶和脂肪酶活性的研究.pdfVIP

《淡水渔业》2004年第34卷第5期 宝石斑体 内蛋 白酶和脂肪酶活性的研究 冯俊荣 刘红梅 韩茂森 陈 营 (烟台大学海洋学院，山东烟台 264005) 摘 要 对宝石斑 (Scortumbarcoo)的胃、幽门盲囊、肠道、肝胰脏等九个部位进行了蛋 白酶和脂肪酶 活性的检测。结果表明，宝石斑 胃蛋白酶的活性最高，其最适pH值为2．2～3．0；幽门盲囊中既有碱性蛋白 酶，也有酸性蛋 白酶，以前者为主，其最适 pH为8．2～8．6。后肠的蛋 白酶活性很低，肝胰脏和脾脏 中检测 到极低的蛋白酶活性，胆汁中未检测到蛋白酶；脂肪酶的活性在肠道的中后段最高，其次是幽门盲囊，胆囊 中的脂肪酶活性稍次于胃，肝胰赃和脾脏未检测到脂肪酶。 关键词 宝石斑，蛋白酶，脂肪酶，活性分布，pH值 鱼类消化酶的研究是鱼类消化生理学研究的重 在 23．0-i-1．0 。 要内容，对鱼类养殖过程中饵料的配制与优化具有 1．2 方法 重要意义。国内外对鱼类消化酶的研究较多，吴婷 ①样品制备 重击鱼的头部将其处死，迅速取 婷和朱晓鸣 研究了鳜鱼、青鱼、草鱼、鲤鱼、 出完整消化道，置于冰盘内，剔除表面脂肪，肠道 鲫鱼、鲢的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性及其在 分为前段 (膨大部分)、中 、中 和后段 (非膨大 肠道内的分布。倪寿文 ¨H研究了鲤、草鱼、鲢 、 部分三等分，分别取适量)。另剪取 胃、幽门盲 鳙鱼、尼罗罗非鱼的肠和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶、 囊、肝脏、脾脏适量，胆囊完整取出。吸干、称重 脂肪酶的活性及其最适pH值。沈文英等 研究了 后，每克组织中加入10mL蒸馏水匀浆。匀浆液于 不同生长阶段银鲫的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤 4℃，以10000r／min的速率离心30min，收集上清 维素酶的活性分布以及它们的最适pH值。王宏 田 液，适当稀释后，置于4~C保存、待测。整个过程 和张培军 …研究了牙鲆消化道 中蛋白酶、脂肪酶 在3～5℃条件下进行。 和淀粉酶的活性。宝石斑 (Scortumbarcoo)，原名 ②蛋白酶活性的测定 肠蛋白酶活性的检测将 高体 ，属于鲈形 目鱼类，原产于澳大利亚等地， 干酪素溶于浓度为0．02molfL，pH=8．0的磷酸缓 是澳大利亚最负盛名的淡水鱼，2001年由青岛现 冲液中，配制成浓度为 1mg／mL的溶液。把 1mL 代农业开发中心首次引进 ，生长良好。由于宝石斑 干酪素溶液与 1mL稀释的酶粗提液混合，于37~C 的性状比较优良，全国各地竞相引进，养殖面积不 反应60min。反应完毕，于沸水中加热10min，使 断扩大。但有关宝石斑生理学方面的研究尚未见报 酶失活。加入3mL考马斯亮蓝染色液，在 20～ 道。本实验测定了宝石斑不同组织和器官中的蛋白 60min内于595nm处测定吸光值。以加入考马斯 酶和脂肪酶的活性，为宝石斑人工养殖中饲料的配 亮蓝溶液的磷酸缓冲液作为空 白对照。对照反应 制提供了有力依据，同时丰富了鱼类消化生理的基 中，先将酶加热灭活，然后再与底物混合，其余步 础知识。 骤相同。 1 材料与方法 蛋白酶的活性以每毫克酶蛋白每分钟使溶液吸 1．1 材料 光值降低的量表示，单位为unit／(min·mg)。 实验鱼5条，取 自青岛现代农业开发中心，健 不同组织中蛋白酶的最适 pH的检测 胃蛋 白酶 康无病，体重500-i-30g，运输前停食，充氧密封 主要为酸性蛋白酶，测定时所用缓冲溶液为0．025 运输。运输后在室内水族箱中暂养一天，水温保持 molfL的磷酸氢二钠一柠