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北京儿童医院急性下呼吸道感染住院患儿中人博卡病毒感染 首都朦科大学附属北京儿童医院张丽丽谢正德 申昆玲 中国庆病预防控制中心国家麻疹实验蜜 唐浏荚檀晓李崇山崔爱剃姬奕瞬许松涛毛乃颍许文波 人博卡病毒(humanbocavirus，HBoV)是2005年9冀由瑞典学者AllanderT等人采褥随撬弓|耪PCR 扩增方法，在对儿童急性呼吸道感染样本进行大规模筛查时，从呼吸道分泌物中首先发现的。HBoV是目 前已知的除细小病毒B19以外与人类疾病相关的第二种细小病毒，感染璺全球性分布，主要集中于3岁以 下芦L童，寒冷季节多见。呼吸道标本的感染率从l。5％到19％不等，部分研究发现该病毒也存在于粪便中。 HBoV感染后主要表现为呼吸道症状，少数还有胃肠道症状。迄今为止在体外未获得HBoV毒株及建立动 物模型，对其与呼吸道疾病靛关系、致病作用及枕理有待迸一步研究。爨前入稍对HBoV的研究主要集中 于呼吸道感染性疾病中，包括上呼吸道感染、下呼吸道感染及哮喘加重，其中下呼吸道感染主要见于肺炎、 急性支气管炎和毛细支气管炎。本文的目的是研究=|匕京儿童医院5岁以下几童急性下呼吸道感染住院』L童 中HBoV的感染情况及其临床特征。 材料与方法 性无菌吸痰管吸取其鼻咽分泌物，在采集的鼻暇分泌物中加入2ml病毒保护液(含10001U／rnl青霉素、 蘸种缨胞进行病毒分离及PCR技术捡测HBoV。 2病毒基因组DNA提取及HBoVNSl基因扩增：采用Trizol法从鼻咽分泌物中直接提取病毒DNA， GGC 具体操作参照TRIZOL说明书。HBoV的NSl基因核羧扩增的上游弓|物为HBoVl；5-TATCAAGGC 扩增片段长度为291bp，每一次PCR反应均设阴性对照，PCR扩增产物用2％琼脂糖凝胶电泳进行检测。 (觅圈1) Nsl 3 HBoVNSl基因序列测定和分析：HBoV GelExtraction Kit)进行纯化，采用ABI MEGA软传进行整理魏分柝。 4统计学分析：所有数据均采用SPSS12．0统计分析软件进行统计分析，采用卡方检验(x2检验)和 秩和检验进彳亍统计分裾，检验水准a=0．05，P0．05差异有显著性。 皇口爿≮结 果 1 ·——1030·—— 检验，P=0．055)。 2病毒分离情况：采瘸HEp．2纛Vero两耪缨胞进行病毒分离未得到HBoV阳性毒椿。 占12。5％(2／16)。既往有喘息史3侧，占18。75％(剪16)(见表1)。 4 HBoV感染患者的临床特征：临床诊断为肺炎10例，占62．5％；毛细支气管炎2例，占12．5％； 天，中位住院天数为12．5天。16例HBoV阳性患儿均有咳嗽及胸片异常表现，胸片为间质和(或)实质 6例，占37．5％。合 息，占62．5％(10／16)，其中1岁以下婴儿占80％。CRP大致正常。WBC10000／ttL 并低氧巍症的2例，占12．5％。l铡硒oV阳性意，毛死亡。所有患，毛均无皮疹、腹泻症状。(觅表1) 5基因序列测定和比较分析：将16份针对HBoVNSI基因的阳性扩增产物进行序列测定，除1份片 st2的氨基酸 100％，氨基酸同源性为98．6--100％。(觅表2) 表l 16铡HBoVPCR检测阳性患j毛晦床特征毙较 Characteristic 璐oVinfection(嚣=16) No．(％)of withcoinfection 3(18．75) patients characteristic Demographic Age(too)，median(rang