CAGE在大肠癌中的表达和其启动子低甲基化的关系及临床意义.pdfVIP

155 用稀钡剂检测十二指肠乳头括约肌 切开术后患者乳头功能 第二军医大学附属长海医院消化内科(200433) 叶萍李兆申 邹多武许国铭徐晓蓉 [摘要]目的：采用X线稀钡剂检测十二指肠乳头括约肌切开(EST)术后患者的乳头功能的改 内气体和钡剂向胆管内的反流情况，来判断乳头的功能。结果：1周随访患者89例(100％)；6月随 体和钡剂胆管内反流的发生。结论：稀钡检测十二指肠乳头括约肌切开术后患者乳头功能是一种有 效的检测方法。EST术后患者乳头内气体和钡剂向胆管内反流的发生率与EST切口大小密切相关， 表明EST术后胆管内反流与胆管炎的发生和发展密切相关。 [关键词)EST术后；x线稀钡钡餐；气体反流；钡剂反流；随访 156 CAGE在大肠癌中的表达 与其启动子低甲基化的关系及临床意义 沈阳解放军202医院消化内科(110003) 尤振宇李里刘光军 癌／睾丸抗原基因(cancer—testis antigen，CTA)的鉴定表明，其共同特点是在多种肿瘤组织中表达， 面睾丸和胎盘除外的正常组织均元表达。肿瘤／睾丸抗原具有肿瘤特异性，该基因产物是一种肿瘤 排斥抗原．能诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性识别和杀伤肿瘤细胞，这一特点使CTA可能成 为肿瘤免疫治疗的靶基因，并在肿瘤的早期诊断及治疗中具有重要意义。癌症相关基因(cancer— associated 一163— 颈癌组织、肺癌组织及多种肿瘤细胞系中均有过度表达，其中大肠癌细胞系50％表达，而它们对应的 正常组织未见CAGE表达。但未做大肠癌组织及腺瘤方面研究，目前国内尚未发现有关CAGE方面 的研究及报告。本研究应用半定量的RT—PCR(reverse PCR) 方法检测CAGE启动子在大肠癌、大肠腺瘤及大肠正常黏膜中的甲基化情况。以了解CAGE在大肠 癌早期发生、发展及细胞增殖中的作用。CAGE编码的抗原是一个新的肿瘤／睾丸抗原。此抗原作 为新的肿瘤特异性抗原及其编码基因的发现，将为肿瘤抗原和肿瘤免疫诊治研究提供了新的途径， 有可能成为癌症早期诊断的生物标志物，也可能成为肿瘤治疗的一种新途径。 材料与方法： RT—PCR法检测CAGE在mRNA水平的表达 肠镜室肠镜检查的患者。对应lO份正常黏膜组织取自距肿瘤10cm以外的部位。将活检标本Ep— pendorf管中，一70℃冰箱保存。 2．总RNA提取按TRIzOL试剂盒说明书进行。 GCCGATACTCCCACT 7一 3．引物序列CAGE(300bp)意义链5’一GGT AT一3’；反意义链5 TTGcTrCAGⅣ盯CCCCGTTT一3 TrrTGGAGG 7。设GAPDH内参照(230bp)，意义链5’一TGA GATCTC GATTrGGTCGTATrG GC一3’，反意义链5’一ACG GG一3’。均由购自大连宝生物公司， Ta地Ra合成。 4．反转录合成cDNA第一链20ul反应体系。 个循环，最后72℃延伸10rain，4℃终止。 锭染色后强度。 7．统计学分析实验数据采用均数±标准差(i±s)表示。计数资料采用x2检验，计量资料采 用F分析和l检验，以上均在SPSS软件上进行。 CAGE基因启动子甲基化的MSP检测方法 中，一70℃冰箱保存。 2．DNA抽提肿瘤组织、正常组织DNA的分离用饱和盐析法。 3．按照Herman方法进行DNA修饰。 4．Wizard DN