北京地区健康肉鸡沙门氏菌流行状况调查.pdfVIP

第四届中国兽药大会——兽医微生物学、兽医生物制品学学术论坛论文集(2012年) 北京地区健康肉鸡沙门氏菌的流行状况调查 张纯萍1，宁宜宝1，宋立1，陈惠娟2习硕3，袁欣3 1 102206) (1中国兽医药品监察所，北京 00081；2扬州大学，江苏扬州225009；3北京农学院，北京 摘要：禽源沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌和食源性病原菌。肉鸡作为人肠炎沙门氏菌感染的主要来源，目前 国内对其沙门氏菌流行状况的研究资料较少。为了了解北京地区健康肉鸡中沙门氏菌的流行情况，本研究共采集该地区28个 31 肉鸡养殖场的盲肠或泄殖腔拭子样品1 0份，进行沙门氏菌的分离和鉴定。总共分离出沙门氏菌54株，血清分型结果表明， 肠炎和爪哇安那为两种优势血清型，所占比例分别为31．5％和25．9％，其次是禽伤寒，占比9．3％。本研究为北京地区肉鸡场 沙门氏菌病的防控及首都公共卫生安全提供了基础资料。 关键词：沙门氏菌；肉鸡；血清型；流行状况 沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原微生物，它不仅能够引起鸡的各种疾病，而且感染鸡耐过后经常 成为隐性带菌者，不定期排毒从而感染其他鸡只并污染周围环境，对肉鸡的养殖造成很大危害；更为重要 的是，肉鸡所携带的沙门氏菌也是一种重要的食源性病原菌，研究u’2。表明，人感染肠炎沙门氏菌主要是由 于食用了被污染的禽蛋和禽肉所引起。 沙门氏菌血清型众多，目前已经鉴定出2500多种血清型。不同国家、不同地区鸡群中的优势血清型不 同，不同血清型的沙门氏菌对鸡和人的致病性也不相同。全球食源性监测网的检测结果表明¨。，引起公共卫 生安全的沙门氏菌主要以肠炎和鼠伤寒两种血清型为主。肉鸡作为人肠炎沙门氏菌感染的主要来源，美国 和欧盟等西方发达国家早在20世纪90年代就已经开展了对食品动物中沙门氏菌流行性的调查，而且每年 都会发布监测结果报告；欧盟还制定了肉鸡肠炎沙门氏菌的严格控制措施和控制目标H吲，但目前国内对肉 北京地区28个肉鸡养殖场的健康肉鸡盲肠或泄殖腔拭子样品1310份，分离其中的沙门氏菌并进行血清型 鉴定，以了解北京地区健康肉鸡沙门氏菌的流行情况，为北京地区肉鸡场沙门氏菌病的防控和首都的公共 卫生安全提供基础数据。 1材料与方法 1．1 材料 1．1．1样品待宰肉鸡泄殖腔拭子或屠宰场肉鸡的盲肠样品：共1310份，分别采自顺义、海淀、怀柔、 采集后4h内分离沙门氏菌。 技术有限公司； 四硫磺酸钠煌绿(TTB)：购自英国Oxoid公司； 营养琼脂：由中国兽医药品监察所提供。 1．1．3沙门氏菌诊断血清(全套193支)：购于泰国SA公司。 1．1．4分子试剂 PCR DNA聚合酶：均由普洛麦格(北京)生物技术有限公司提供； buffer、dNTP和GoTaq DL2000DNA Marker：购于宝生物工程(大连)有限公司。 1．1．5引物合成与测序分别由英俊生物技术有限公司北京合成部和北京测序部完成。 1．2方法 1．2．1 沙门氏菌的分离与鉴定根据本实验室建立的方法哺1进行沙门氏菌的分离，具体为：将泄殖腔拭子 或者盲肠样品用SC和TTB增菌液进行常规增菌培养，然后分别取l环增菌液划线接种于沙门氏菌显色培养 基和XLT4培养基37℃培养过夜，可疑菌落用营养琼脂进一步纯化。 一166— cac caa aac aaatta CC8 aa和tca C，反应条件为：94。C 分别为：gtg tcg cgttcgggc tcg cgt agg 1．2％的琼脂糖凝胶上电泳后进行凝胶成像分析。 1．2．2沙门氏菌的血清分型将沙门氏菌接种营养琼脂平板，37。C培养过夜后根据泰国血清的操作说明和 国标中沙门氏菌的检验方法旧’分别进行菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原的检测，以生理盐水作为阴性对照， 与试验抗血清出现凝集反应者即判定为阳性。 根据0抗原和H抗原的检测结果，参照沙门氏菌属抗原表一1判定血清型，分析结果。 2 结果