成年犬骨骼肌成肌细胞体外简易培养法.pdfVIP

2007年10月 第十七届中国内镜医师大会 成年犬骨骼肌成肌细胞的 体外简易培养法 朱文辉1，王予彬1，华咏：，符雪莲3 (1同济大学附属东方医院运动创伤关节外科，上海200120； 2．同济大学附属东方医院中心实验室，上海200120； 3．同济大学附属东方医院病理科，上海200120) 摘要：目的探索一种体外分离纯化犬骨骼肌成肌细胞的简易方法。方法取成年比格犬 股中间肌一块，采用机械分解法、一步酶消化法消化分离获取成肌细胞，利用差速贴壁法进 行纯化。观察分离纯化后的成肌细胞的生长状况，绘制细胞生长曲线；并对分离纯化后的成 肌细胞进行形态学研究及结蛋白免疫细胞化学的鉴定。结果采用该法分离的成年犬成肌细 胞成功率高，培养过程生长旺盛，呈现出干细胞的特征，存活率高。免疫细胞化学鉴定显示 90％以上的细胞呈肌细胞特异抗体(结蛋白染色)阳性反应，说明该法获得的成肌细胞纯度较 高。结论该法提供了一种体外成功分离纯化成年犬骨骼肌成肌细胞的简易方法，成功率高， 简便易行，值得推广；同时该研究也为利用犬进行成肌细胞治疗的研究奠定了实验基础。 关键词：比格犬；成肌细胞；Jig外培养；分离纯化；简易法 adultcanineskeletal Invitrocultureof witha method myoblastsimple ZHU Xue—lian3 Wen—huil，WANGYu—binl，HUAYon92，FU 200120，p．IK．China Hospital，TonalUniversity，Shanghai (1．DeparmentofSportsInjuryandJointSurgery,，East ofCentral 200120，P．R，China 2．Deparment Laboratory，EastHospital，TongjiUniversity，Shanghai of 2001 20，PIK．China) Pathology，EastHospital，TongjiUniversity，Shanghai 3．Deparment a ofthecultureand ofthe simpleprocedure purification ABSTRACT【Objective】Toexplore canineskeletal in vastnsintermediusofadultcaninewasobtained， vitro．[Methods]The myoblast mechanical and en—。 fromwhich wereisolatedandharvested myo