谷氨酸转运体在全脑缺血性癫痫中作用地研究.pdfVIP

i坦蜃业垃会神墅±}型堡盟熊金二_二酋鱼垒旦i!盔盘盒造塞堑缠 谷氨酸转运体在全脑缺血性癫痫中 作用的研究 邱永明 陆兆丰江基尧 罗其中 j海第：二巨科人学仁济医院神经外科(200127) 脑缺血与癫痫有着非常密切的关系。颅脑外伤、脑肿瘤术后和脑血管疾病等出现癫瘸，腑缺血 是其原因之一。最近十多年来脑缺血的损害机制及临床治疗取得了长足的进步，相对来说，癫痫的 发qi机制和治疗仍是富有挑战性和亟待解决的难题。研究显示癫痫与脑缺血的损害机制有较多相似 之处，其中，兴奋性氨基酸又是两者主要的损害机制。通过全脑缺血与相关癫痫的比较研究，阐明 全脑缺血所致癫痫的发生机制，进一步为癫痫的治疗寻找新的途径。 材料与方法 1．实验动物与分组：以sD大鼠为实验对象，通过压迫大鼠胸部造成全脑缺血性癫痫模型，具体 参见张氏方法…，胸部压力再量为大鼠体蘑的8倍，压迫时闸8分钟。大鼠分为四组：对照组(cIfj， 8)和全喊 况分别：正常大鼠；进行麻醉插管、操作，但未实施胸部压迫；实施胸部压迫后按时间观察未发生癫 痫；实施胸部压迫后按时问观察发生癫痫。 2、脑电描c已及行为观察：应用Oxford脑电记录仪记录发作期间大鼠脑电图。6枚针状电极放置 在两侧颞部，前额部及两侧枕部。其中双侧颓部分别为参考电极和接地电极，双侧前额及枕部为记 录咆极。测定时间为20分钟。大鼠癫痫发作程度观察，在Racine的五级评分基础上，采用八级评分 法“。具体分级：1级口面抽动；2级一点头运动；3级一前肢阵孪；4级一后肢站立和阵挛发作；5 级一跌倒和突然活动停止；6级一狂奔；7级一强直性反张；8级～死亡。 3病理学及免疫组化检测谷氨酸转运体的表达：取大鼠拇马CAl及皮层运动区为研究区域，用 4％多聚甲醛溶液灌注，断头取脑，光镜病理形态学检测。采用双盲法400倍显微镜F从神经组织区 一端开始计数正常神经元数，以其密度作为评价缺血损害的指标。神经元密度(个／mm)=正常神 经元数／长度应用UtraSensitive s—P免疫组化染色试剂盒进行组织芯片免疫组织化学观察三种谷氨酸 转运体的表达。包括脱蜡和水化；抗原修复和免疫组织化学染色程序。应用KS400图像分析系统行 组织芯片病理染色分析及处理，结果用强阳性表达率来表示。 结果 本实验大鼠癫痫发作发生率为64％(50只胸部压迫造成脑缺血大鼠，32只发￡E癫痫)。癫痫大 鼠脑电表现为棘渡、慢波以及棘慢综合波。这些癫瘸大鼠均表现为对声音刺激极为敏感，n，反复被 100db声音诱发，必须饲养于安静的环境中，并可诱发出3级以l二(包括3级)癫痫发作。全脑缺血 无癫痫组大鼠有明显的行为学的改变，但未见痫性脑电图表现。 胸部挤压后不同时间全脑缺血无癫痫组(PI)和全脑缺血癫痫组(E1)神经元计数比较，呵见多 个时间点EI组神经元计数少于P1组，这点与光镜观察到的病理形态学改变一致。 免疫组织化学法可清晰地显示谷氨酸转运体表达的变化。在CAI匿及皮质，PI纽与EI纽谷氰酸 转运体变化比较。 748’ 生崮廷业坐金煎墅处型医』巫佥垒=苴旦垒凰熊壹盘垒造塞堑盟 25± 1 79± 1 0．05)。El组。j PI组表达相比各时点无显著差异(P0．05)。 15± 1 挤压后EI组表达显著低于H组(P0．05)。 10±2 ±2．10，28．301±1．50，20 (P0．05)，m 高于对照组及假手术组(P0．05)。 讨论 癫痫是神经系统慢性疾患，年发病率为35／10万，我国每年有45万新发癫痫患者，总数约650 万。