复方丹参滴丸和其主要成分丹酚总酸A、B对光化学引起细静脉血栓的抑制作用和其原理(摘要).pdfVIP

申华中医药学会血栓病分会成立大会暨首届学术研讨会论文汇编 复方丹参滴丸及其主要成分丹酚总酸A、B对光化学引起细 静脉血栓的抑制作用及其原理(摘要) 刘育英、刘连神、王芳、曾庆江、孙凯、方淑萍、杨继英、 王传社、胡白和、安丽华、赵新荣、常昕、樊景禹、韩晶岩 北京大学医学部天士力微循环研究中心 一、目的 丹参素钠、丹酚总酸、丹酚酸A、丹酚酸B是复方丹参滴丸中丹参的主要成分，国内外 学者对丹参的活性成分和药理作用进行了大量研究，复方丹参滴丸用于心脑血管疾病的治疗 也越来越广泛。我们的研究已经证明了：复方丹参滴丸对缺血再灌注引起的微循环障碍有多靶 点的改善作用。为进一步了解复方丹参滴丸的组方成分中抗血栓的作用，本研究在已有研究 的基础上，用光化学方法建立的大鼠肠系膜微循血栓形成模型，研究丹参素钠、丹酚酸A、 丹酚总酸预防血栓形成的作用，同时用阿司匹林、SOD作为参照，并用细胞流式检测技术测定 大鼠肠系膜微血管血栓形成后，血管通透性、过氧化物的生成、血小板粘附因子CD31、CD6l 的表达、用电子显微镜进行血管内皮和血小板的形态观察，探讨上述成分抑制血拴形成的原 理。 二、材料和方法 1．选体重200．2509的SD雌性大鼠，动物分为对照组、模型组、丹参素钠、丹酚酸A、 B、丹酚总酸、阿司匹林、SOD共8组。 2．大鼠麻醉后由股静脉注入血啉甲醚光敏剂(0．25m∥1009体重)，作为光化学反应剂， 选择3m50岬1的肠系膜细静脉在倒置显微镜下进行微循环观察，然后，用100瓦汞灯作光源经 蓝色滤光片，照射在选定的细静脉上，光斑直径为200岬。 3．观察血管内血栓形成，测定血栓形成的时间、血栓的大小。给药组分别在实验前20幽 给药，丹酚总酸、丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素钠，将药物分别用生理盐水溶解成水溶液， 按lOmg瓜g的给药量，由大鼠尾静脉注入。模型组只给光敏剂，对照组不注射光敏剂，不进行 光照射。 4．血管通透性的测定，由静脉内注入50 mg／l(gFrrC标记的牛血清白蛋白(Sigma CCDc锄era 的摄象机(EB C7190；H锄锄atsu 图象在注荧光前和后的荧光强度，通过龇～GE．PROPLUS分析软件对血管内外的荧光强度进 73 中华中医药学会血栓痛分会成立大会暨首届学术研讨会论文汇编 行测定。 123 5．细静脉管壁DHR萤光强度的测定用：用过氧化氢的荧光探针Dillydrorhodarnine (Dm己；M01ecular 用强化硅靶的超敏感摄象机，观察并记录光化学反应前、后10分、20分、30分时肠系膜细 静脉壁的荧光强度。用光化学反应前的细静脉壁与细静脉外肠系膜间质的差为基础值，计算 肠系膜细静脉壁DHR萤光强度的变化率．。 6．统计处理每组数据均以x±s表示，用学生T-TEST检验，对实验结果进行统计学 处理。 三、结果 1．血拴形成开始时间及血栓面积：对照组在照光过程无血栓形成，模型组注射血卟啉经 蓝光照射后21．42s细静脉管壁开始出现血拴。丹酚总酸、APS组血拴出现时间分别为54．28、 54．85s显著地延长了血栓出现的时间、与模型组比血栓出现的时间有明显差别。丹参素钠 35．4s、丹酚酸A丹酚酸B分别为38．25、30．5．血栓出现的时间比模型组晚，但没有明显差别。 根据血栓形成的大小，用m队GE．PROPLus分析软件测定血管平面二维的图象不同时间血栓 的大小。各组细静脉经照光后5．10Ⅱl洫血栓面积明显增大。模型组、丹酚酸A、B，血栓面积 增大较明显，2蛐l和30min血栓有不同程度脱落，血栓面积减小，减小较明显的组别依次 为ASP、丹酚总酸、SOD、丹参素钠。 2．血管通透性的影响：对照组动物经颈静脉注入荧光标记血清白蛋白，连续观察30Inirl， 肠系膜细静脉血管周围无明显荧光的渗出。模型组血栓形成后血管外荧光渗出逐渐增多， 30n血后荧光渗出明显增多。阿司匹林组血管周围渗出比