黄瓜花叶病毒亚组I与Ⅱ分离物的形态与理化性质研究.pdfVIP

， 黄瓜花叶病毒亚组I和Ⅱ分离物的形态和理化性质研究。 徐平东1沈春奇2林奇英3谢联辉3 (1厦门华侨亚热带檀物}1种菌茸索檀暂引种■青橙疫基地，厦门361002 ：厦门新刨科技有限公司一福建农业大学檀暂病毒研究所’ 撮叠对分属于黄瓜恙叶病毒(CMV)亚组1和I的20个分离轴或株来进行捉地和粒体雕态、部分理 化性质洲定．结果20个分一袖或埠来的曩地病毒的蕾外吸收均星鼻型的植蛋白嚷t●点，量毫吸收在 量相置报太，量高速783mg，kg蚪叶缸识，t饭仅17mg／kg并叶缸织．20个分^糟置肆童的曩地冉毒 胜电昧(SDS)测定。均由单个亚l组成，分子t妁为27ku． 关■调黄瓜花叶病毒亚蛆 形态 基化性质 mosaic 黄瓜花叶病毒(cucumber 病毒属(ck“mo曲一)的典型成员，寄主范围极其广瑟，能浸染1000多种植物，是分布最广、寄 主植物最多、最具经济重要性的植物病毒之一。陡着对CMV引起病害的广泛研究，已从各种植物 上分离到100多个CMV株系或分离物。根据这些CMV分离物的寄主反应、血清学关系、瘸毒外 壳蛋白(Coat 以及核酸序列分析等可以区分为两个性质不同的亚组．但是。CMV不同亚组分离物或株系在粒体 形态、紫外吸收和病毒外壳蛋白分子量等方面是否存在差别，未见报道．本文报道对分属于CMV 不同亚组的20个分离物或株系(16个属亚组I，4个属亚组1)的粒体形态及部分理化性质研究 结果。 7 1材料与方法 1．1毫蔫 本研究所用的20个CMV分离物或株系的来源及其所属亚组见前文。 1．2瘸毒的摄纯 1．2：。1方法1按徐平东等(1997)的方法。 0976)的方法，进一步提纯采用蔗糖梯度离心。用于M株 1．2．2方法2粗提纯参考Mossop ’ 系及其它按方法1无法提纯或提纯产量低的CMV分离物的提纯。 1．3提纯I舅毒的繁外吸收测定 DUB型或PE 用Beckman ki，1979)。 ·福鸯省自然科学基金资助项目．农业部檀物检疫实验所张威良、张作芳研究员．华南农业大学青乔■教授，浙扛农业大学 生物技术研究所周雪平博士．美国康紊尔大学植病幕凌开树博士·分别提供部分毒穰，特此鼙谢． 201 1．4病毒粒体的电镜观察 用常规醋酸铀法负染后JEM一100CXI型透射电镜观察。 1．5病毒外壳置白分子量测定 为0．i％。用IS一1000型数字戚像系统(AlphaInnotech公司产品)的分子量测算软件计算各分离 serum B(97400)，Bovine 200000)。Phosphorylase 2结果 2．1囊毒的摄纯产量、紫外吸收豆粒体 采用方法l或方法2对20个CMV分离物或株系进行提纯，获得纯化病毒．挺纯病毒的紫外 值依不同分离物为1．4～1．8f各分离物的提纯产量相差很大，最高产量达783mg／kg鲜叶组织，最 低产量仅17mg／kg鲜叶组织(表1)。电镜观察表明20个CMV分离物或株系的提纯病毒粒体均为 (分离物PE2为24nm～26nm)，亚组1分离物为28nm～30nm。 2．2病毒外壳蛋白分子量 20个CMV分离物或株系的CP分子量经多次SDS—PAGE测定，结果所有分离物或株系的 CP都是由单个亚基组成，经分子量溅算软件计算，分子量均约为27ku。 寰1 20个CMV分^■重糠囊的粒体大小、肇外爱收和■冀产量 b一按方法1提纯Ict按方沽2提纯 ·a。量寿产量I 田1 CMVw组I和1分■■●々摄一■毒牧体