CPB-ST融合基因的构建和表达研究.pdfVIP

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第27卷增刊 卫生研究 V01.27Supplement oFHYGIENERESEARCH Aug. 199845 1998年8月 JOURNAL CPB—ST融合基因的构建及表达研究” 王玉炯许崇波1冯书章1朱平1殷震 (宁夏农学院,银川750105) 1双酶切合有大肠杆菌耐热性肠毒素sT。前体蛋白基 摘要用限制性核酸内切酶EcoRI和Sal 的双酶切处理的带有产气荚膜梭菌p毒素基因(CPB)的重组质粒pECB2中CPB基因的下降,转化受 组菌株BI ELISA检测,结果表明重组菌株可以表达CPB.ST融合蛋白,而且该融合蛋白无天然p毒素和ST,的 生物毒性。 关键词产气荚膜梭菌太肠杆菌CPB—sT融合基因融合蛋白表达 StudiesontheConstructionand Expression FusionGene ofCPB—ST ai. WangYujiong,XuChongbo,FengShuzhang,ZhuPing,et 750105,China) (NingxiaAgriculturalCollege,Yinchuan WeusedrestrictionendonueleasesEeoRI andSalI todigestplasmidpXSTlcontainingpre— STl thatencodesforheat—stableenterotoxinofEscherichiacoliandrevoveredthe STI gene 325bp 51_terminusofSTl wasfusedto31_terminusofCPB beta— fragment.The gene gene(encoding gene toxinofClostridiurn the thathadbeencleavedwithEcoRI andSal pe析ingens)inplasmidpECB2 I.Therecombinantwasstudiedindetailrestrictionendonuclease result pECB—STl by analysis.The of showedthattherecombinantcarriedCPB—STlfusion transformationE.eoli plasmid gene.By BL21(DE3),weE.coli recombinantstraincan CPB—ST got BL21(DE3)(pECB—STl).Theproduce fusion andELISA.andthefusion wasnontoxic. proteinbySDS—PAGE,Wester

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