SAXS法研究胆固醇（Cholesterol），CaCl2溶液对卵磷脂（PC）生物膜通透性影响.pdfVIP

篁主壁垒里圣墅竺塑墅兰查叁垫笙塞篓 !!!!竺!!旦茎墨 SAXS法研究胆固醇(Cholester01)，CaCi2 溶液对卵磷脂(PC)生物膜通透性的影响 姚松年 童华 (武汉大学测试中心，武汉，430072) 卵磷脂液晶相是一种重要的分子有序体，也是生物膜的理想模型，在分子水平上研 究各种物质对脂膜的通透性的影响，一直受到人们的关注，生物膜所处的内环境有多种 离子，对膜的结构和功能有极大的影响。在前人基础上，我们进一步以胆固醇(Ch01)镶嵌 卵磷脂在CaCl2溶液中形成的层状液晶为模拟体系，用SAxS方法方法测定脂水层厚度， 并引入渗透率参数P。通过脂水层厚度变化考查Chol和电解质对该液晶体系脂水介面通 透性的影响，用SAxS方法研究生物膜的通透性还未见报道，具有一定方法学意义。 1．实验部分 I I仪器与试剂： 仪器：D／max-rA型12KW旋转阳极X-ray衍射仪，小角散射附件。 试剂： 卵磷脂 上海华东师大生化试剂厂。 胆固醇、CaCh均为分析纯。水是二次蒸馏水。 12实验： 将摩尔比Rl11c为0、2：8、3：7、5：5、7：3的Chol和PC混合物分别溶于氯仿中， 加温减压蒸发去水，准确称量500mg数份置于磨口称量瓶中，分别加入水和浓度为 1Mol L’1的CaCl2溶液配制成如表3-I所示配比的样品。又按Kb棚为2：8、3：7，分别加 1 入等量的0 M01．L“和0．5M01．L‘1的CaCl：溶液。以上样品均为混合后置于特制的SAXS 样品架上，待测。 衍射仪实验条件：CuK。辐射，Ni滤波片，管压40Kv，管流50mA。狭缝条件：一级 狭缝o08ram，二级狭缝006衄，三级狭缝调至最佳状态，接收狭缝0．1mm，防散射 狭缝04mm。测量范围3．50-0 50／ram。量程根据样品而定， 010(20)。连续扫描速度0 时间常数1秒，走纸速度lOmm／mm。 2．结果与讨论 在实验中可观察到，在脂层厚度基本不变化的情况下，虽然加入等量的溶剂，但溶 剂层厚度随Rchd∞(Chol与PC的摩尔比)和CaCh浓度各不相同。这说明有一部分溶 剂另有所在，如果系统保持层状液晶的单相，那么，多出来的这部分溶剂只能渗进烃链 区，由于渗漏通过脂水介面进行，所以渗漏的量应与脂水介面通透性有关。这种溶剂对 双亲分子层的渗透率用P来表示。有文献曾报道十二烷基磺酸钠／正戊醇，水体系中，水的 渗透率可高达50％以上。 假设溶剂的含量不改变表面活性剂分子与其液晶层面的角度，也不改变烃链的混乱 度，则可得到理论层间距的计算公式…j： 87 v，W，D分别表示各组分的体积，质量和密度，d*是液晶层间距的计算值，d0是水 为0时的脂双层厚度，其中： 059／m1． p$=1009／mi，pPfl．029／ml，Pca。1=1 渗透率： P=(d”d女p，d女×100％。d女是液晶层间距的实测值 以下分别从Chol，I-t20和CaCl2三种因素来考查它们对渗透率P的影响： 表1水的渗透率随胆固醇含量变化 I墨垒m盟I! l!：；i l Q：箜 凹 瞄! I 匦塑 l!!：； l!：! l!：： I!：! lZ：! l 表1列出了固定水的百分含量在 302-1％不变时，水的渗透率随胆固酵含量 变化的情况。可知，随胆固醇含量增加P 呈下降趋势。图1的三条曲线分别是Rcbd