可发光可连续检测原位前列腺癌模型的建立.pdfVIP

·1192· ·动物模型· 可发光可连续检测原位前列腺癌模型的 建立 宋超廖文彪杨嗣星王玲珑 【摘要l 目的建立一种可连续定量监测的原位前列腺癌动物模型。方法 利用分子克隆技 术构建表达荧光素酶的慢病毒载体，用慢病毒将GFP—Luciferase融合蛋白载体转染到人前列腺癌 PC3细胞株；利用稻瘟素Blasticidin筛选获得稳定转染的GFP-Luc—PC3细胞株。将6只雄性裸鼠随 机分2组．应用5×106 GFP-Luc．PC3或普通PC3细胞雄性裸鼠皮下注射获得皮下瘤。12周时无菌 条件下取荧光素酶标记和未标记的皮F肿瘤组织，将其切成2mm3大小的组织块，并将组织块随机 种植于24只雄性裸鼠前列腺包膜下．实验组、对照组各12只。用IVIS200光子发射定量分析动态 6 监测肿瘤生长。并于种植厉2…4 8周分别处死3只裸鼠，取前列腺组织称重。分析肿瘤在体光子 值与其蓖量的相关性。结果成功建立GFP．Lue．PC3细胞株，该系生长曲线与未标记细胞一致，在 荧光素作用下，发光能力与细胞数鼍呈正相关(r=0．997)，其裸鼠皮下成瘤率为100％。原位前列 腺癌模型中，所有24只动物均形成前列腺肿瘤，其中GFP-Luc-PC3组可通过IVIS200系统观察到肿 6 瘤组织的发把隋况．PC3组信号不明显。原位肿瘤模型建立后2…48周，肿瘤在体光子值(光子 00)E+05、(82．66208±1．23100)E+05、 值／秒，photons／second)依次为(69．13298±2．079 57±2．321 (91．942 00)E+05、(130．64340土3．24700)E+05。肿瘤重量依次为(9．67±1．07)、 (12．47±2．12)、(16．45±2．57)、(21．43士4．56)g。肿瘤离体成像的肿瘤重量与其在体发光值呈线 性正相关(r=0．973，PO．05)。结论可发光可动态观察的原位前列腺癌模型可以在不处死动物 的条件下，在体外连续动态观察肿瘤在原位的生长。 【关键词】前列腺癌；荧光素酶；生物发光；转基因 Non—invasiveofGFP·luciferase cancermodelinnudemice labeled imaging orthotopicprostate using bioluminescenceSONG system Chao，出0Wen—biao。YAMSi—xing，WANG厶M．10ng．Department ofUrology。RemninHospital矿耽^ⅡnUners厶r．Wuban430060。II强ina anth07：YANG Corresponding Si—xing。Email：sxyan92004@163．corn innudemice To model forsensitive 【Abstract1 0bjectivedevelopprecliniealorthotopic prostate cancereelI tumor bioluminescent Thehuman during using tracking progression technique．Methodspros- latecancercelllinePC3cellsweretransducedwith fluorescent fllsion green protein(GFP)一luciferasegane al