南方红豆杉内生真菌的初步研究.pdfVIP

—-——332．—— 江苏农业科学2013年第41卷第9期 于淼，杨梅，张连茹．南方红豆杉内生真菌的初步研究[J]．江苏农业科学，2013，41(9)：332—335 南方红豆杉内生真菌的初步研究 于淼1，杨梅2，张连茹2 (1．宁夏大学生命科学学院，宁夏银川750021；2．厦门大学生命科学学院，福建厦门361005) 摘要：从共生理论出发，对采自福建省龙岩山区的药用植物南方红豆杉的内生真菌进行分离。从南方红豆杉的树 叶、短茎和树皮中共分离得到107株内生真菌。抗菌、抗氧化和抗肿瘤活性检测结果显示，其中有8株菌对1种或者 几种指示菌有一定的抗菌活性，占供测菌株的7．48％；有40株菌对HeLa细胞有较强的细胞毒活性，占供测菌株的 明南方红豆杉植物中含有丰富的菌种资源，具有开发生物活性物质的潜力。 关键词：南方红豆杉；内生真菌；生物活性 中图分类号：Q178．531文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2013)09—0332—04 微生物与植物有极其密切的关系，其中根瘤菌与豆科植 物碱尤其引人瞩目[7-8]。但由于红豆杉生长缓慢、资源短缺、 物、菌根真菌与木本植物的共生关系早已为人们所熟知。植 树皮中有效成分含量很少，提取利用受到极大限制，因此，开 物内生真菌是指那些在其生活史中的某一段时期生活在植物 展红豆杉内生真菌的分离及其代谢产物的研究，将为人类从 组织内部而不会引起植物组织产生明显病害症的真菌¨。。 微生物角度寻找抗癌药物开辟～条新的途径。 temulentum 1898年Vogl从黑麦草(LoliumL．)种子中分离发 1材料与方法 现了第1株内生真菌、2o，至今已有100多年的历史。植物内 生真菌普遍存在于各种陆生及水生植物中，具有非常广泛的 1．1试验样品 宿主多样性。由于植物内生真菌生活环境的多样性和特殊 南方红豆衫树皮、短茎、短叶等植物样品于2007年3月 性，在其次级代谢产物合成方面具有以下明显特点：不仅能产 采自福建省龙岩山区。 生一些结构独特、骨架新颖的活性化合物，而且很有可能合成 1．2抗茵活性测定用指示菌 与其宿主相同或相似的生理活性物质。自1993年Strobel等枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、短小芽孢杆菌(曰． 从短叶红豆杉的树皮中分离到1株产紫杉醇的内生真菌—— coli)、金黄色葡萄球菌 pumilus)、大肠杆菌(Eschenchia 安德氏紫杉霉(Taxomyces觎dre。瞅炉1以后，从植物内生蓥 aureus)、藻黄八叠球菌(Saminalutea)、白色 (Staphalococcus 中寻找和发现新的活性化合物逐渐成为内生菌的研究热点， 假丝酵母(Candidaalbicans)，均为宁夏大学生命科学学院实 目前从植物内生真菌中得到的次生代谢产物包括抗生素、抗 验室保存菌种。 肿瘤和抗氧化等多种活性化合物HJ。 1，3肿瘤细胞株 红豆杉科红豆杉属(Taxus)植物为第3纪孓遗植物，在地人宫颈癌HeLa细胞，购于中科院上海细胞所。 1．4常用的培养基 球上已生存繁衍了250万年”1。20世纪70年代，Wani等从 短叶红豆杉(zbrevifolia)提取分离得到的天然抗癌化合物紫细胞培养基(DMEM)：10g干粉DMEM溶于1L双蒸水 杉醇，具有独特的抑制微管解聚和稳定微管作用，对卵巢癌、 中，加入3．17NaHC03搅拌均匀，溶解后加10％一15％已灭 g