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线粒体膜电位探针使用指南 在评估线粒体功能时，常常要用到监控线粒体膜电位的探针，就是大家常常提到的 JC-1、Rhodamine 123 等。然而，在使用过程中，还需要仔细考虑多个控制，以及非质子电荷对染料行为的影响，才能正 确地阐释结果。为此，美国罗彻斯特大学医学及牙医学院的研究人员撰写了一篇使用指南，讨论了实验 过程中一些重要的技术考虑、控制以及平行互补分析。文章发表在必威体育精装版一期的《BioTechniques》上。 近年来，测量线粒体膜电位的荧光染料已成为 在淬灭或非淬灭模式下使用。淬灭模式只适用于第 常用的工具，来监测重要的线粒体参数的改变。线 二种类型实验中 Δψm 的快速变化，而对于较为缓 粒体膜电位本身是细胞健康或受损的重要指示剂。 慢的变化，或确定实验处理后两个群体的 Δψm 差 而这些染料一般是亲脂性阳离子化合物，它们在线 异，则适合非淬灭模式。 粒体膜基质空间中积累，与Δψm 呈反比。 此外，作者还详细列出了用阳离子探针测量 测量线粒体膜电位的染料有很多种，包括 Δψm 的实验指南，一步一步，相当详细，非常适合 TMRM、TMRE、Rhodamine 123、DiOC6(3)、JC-1 入门者学习。最后，作者还提到了一些关于染料上 等，每一种都有其优势和劣势。作者在文章中就介 样和检测的考虑因素，利用多个方法来定量荧光变 绍了常用染料的优势以及潜在的困难，并强调了在 化，控制线粒体形态、定位或质量的变化等。 生命科学研究中突出其有效应用的最佳方法。 这篇文章是可以免费查看的，如果您正准备开 对于如何计划实验，作者也给出了具体的建 展线粒体膜电位方面的研究，那不妨看看，真的很 议。通常有两种类型的实验：第一种，在细胞或组 实用。（生物通 薄荷） 织的慢性处理之后，研究人员希望确定 Δψm 如何 原文阅读： 改变；第二种，研究人员希望监测急性处理相对应 的Δψm 变化。尽管乍一看，第二种方法似乎更为 Mitochondrial membrane potential probes 困难，但实际上每个样品/条件都能充当急性处理 and the proton gradient: a practical usage guide 前的基线或内对照，因此通常能提供更容易阐释的 BioTechniques, Vol. 50, No. 2, February 结果。作者还详细讨论了两种方法的考虑因素。 2011, pp. 98–115 至于选择哪一种方法来使用染料，使用何种染 料，作者认为这是由实验需求确定的。这些染料可 2011年4月15日第八十三期 第 24 页，共 34 页 下一页 返回