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第34卷第 1期 日用 化 学 工 业 VoJ．34No．1 2004年 2月 ChinaSurfactantDetergent Cosmetics Feb．20o4 羟基甲氧基苯甲醛在化妆品中起增 白作用的研究 宋康康 ，黄 璜 ，陈清西 ，陈丽娟 ，温文忠 ，陈盛阳 (厦门大学 生命科学学院，福建 厦门361005；漳州片仔疾皇后化妆品有限公司，福建 漳州 363000) 摘要：采用酶学动力学方法研究2一羟基 一4一甲氧基苯 甲醛 (HMB)对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的 抑制效J 结果表明．HMB对酪氨酸酶单酚酶的效应只表现对稳态活力有明显的抑制作用，但对酶作用的 迟滞时问没有影响；随着抑制剂浓度增大，单酚酶活力呈指数下降，导致酶活力下降50％的抑制剂浓度 (1(：)为0．352mmt1．L～ HMB对二酚酶的抑制作用表现为可逆过程，Ic为0．164mmol·L ；抑制作用机 研究表明HMB是一种混合型抑制剂，其抑制常数 Kl和K 分别为 0．131mmol--‘。和 0．253mmol·L一。通 过对HMB抑制酪氩酸酶机理的研究．阐明HMB作为化妆品添加剂的增 白作用机理。 关键词 ：化妆品添加剂；增 白作用 ；酪氨酸酶；抑制机理 中图分类号：TQ658．5 文献标识码：A 文章编号：1001—1803(2004)01—0065—04 酪氨酸酶 (EC 1．14．18．1)，是一种铜蛋 白，其 中，再加 2．8mL预先在 3O℃恒温水浴保温的底物溶 活性中心的双铜离子在酶催化中起重要作用。该酶广 液 ，然后加 0．1mL酪氨酸酶水溶液 ，立刻混匀 ，在 泛存在于生物体中，是生物合成黑色素的关键酶_lJ， 3O℃恒温下测定波长为475BITI的吸光值随时间的增 j色素障碍性疾病及恶性黑色素肿瘤的发生与治疗有 长直线，从直线斜率求得酶活力，消光系数按 (￡= 关 。在美容保健』二，酪氦酸酶抑制剂作为化妆品添 3700otol ·L·cm )E4]计算 。测定单酚酶活力时，酶 加剂，用来美 白、护肤及去除黑斑。早期的纯化学物 的终质量浓度为33．3mg·L～；测定二酚酶时，酶的 氢醌、中期的果酸及组织提取物胎盘膏和近期的植物 终质量浓度为 6．67mg·L～，DMSO终质量分数为 提取物一熊果苷、维生素 c衍生物及甘草提取物等， 3．33％。仪器为 uV一650分光光度计 。HMB对酶的 它们都有护肤、消除黑斑和增 白的效果。最近 ，kubo 抑制作用机理判断是通过Lineweaver—Burk双倒数作 等人 从非洲产的萝摩科Mondiahitei和漆树科掌漆树 图，比较 酶催化反 应的动力学 参数，包括表观米 Rhusvulgaris等中提取 出一种酪氨酸酶抑制剂 (2一羟 氏常数 (K )和最大反应速度 ( )的变化来判 基 一4一甲氧基苯甲醛)，并初步研究其对酪氨酸酶 的 断[。 抑制效应?此文报道 HMB对酪氨酸酶抑制作用机理 2 实验结果 和抑制动力学的实验结果 ，提出该抑制剂与酶分子间 2．1 HMB对酪氨酸酶单酚酶活力的影响 结合作用的分子模型，以期为阐明HMB用于化妆品 酪氨酸酶催化酪氨酸加羟并氧化的反应进行曲线 具有增 白作用的分子机理提供理论依据。 显示有迟滞过程 J，此为该酶反应的特征之一 。以 1 材料与方法 HMB为效应物 ，酪氨酸酶催化酪氨酸氧化过程见图 1 (1)材料 ：酪氨酸酶 、二 甲亚砜 (DMSO)为 (纵坐标为475nlTl处的吸光值，曲线 1～6的HMB的 Sigma化学公司产品；L一3，4一二羟基苯丙氨酸 (L 浓 度 分别 为 0、0．2mmol·L～、0．4mmol·L～、 — DOPA)、I一酪氨酸 (Tyr)和 2