仪器分析实验二讲义.doc

实验二 头孢西丁分子式：C16H17N3O7S2分子量：427.45CAS号：35607-66-0 〖药物名称〗甲氧头孢噻吩、噻吩甲氧头孢菌素、美福仙、先锋美吩、头孢甲氧噻吩、头孢甲氧霉素、头霉噻吩、头霉甲氧噻吩。 〖英文名〗Cefoxitin, Mefoxin, Cefoxitin Sodium, Cenomycin, MK-306 〖药物作用〗 作用与第二代头孢菌素相似。对革兰阳性菌的抗菌性能弱。对革兰阴性菌作用强。对大肠杆菌、克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、淋球菌、奇异变形杆菌、吲哚阳性变形杆菌等有抗菌作用。本品还对一些厌氧菌有良好的作用，如消化球菌、消化链球菌、梭状芽孢杆菌、拟杆菌对本品敏感。氯脓杆菌、肠球菌和阴沟杆菌的多数菌株对本品不敏感。 〖作用与用途〗 本品为半合成第二代头孢菌素，特点为对革兰阴性菌有较强的抗菌作用，具有高度抗β内酰胺酶性质。抗菌谱包括大肠杆菌、肺炎杆菌、吲哚阳性的变形杆菌和沙雷氏菌、克雷白杆菌、流感杆菌、沙门菌、志贺菌等。对葡萄球菌和多种链球菌也有较好作用。临床主要用于敏感菌所致的呼吸道感染、心内膜炎、腹膜炎、肾盂肾炎、尿路感染、败血症以及骨、关节、皮肤和软组织等感染。 二 实验目的 初步掌握高效液相色谱仪的操作使用。 三 色谱条件 仪器：岛津LC-20AT， LC-2010CHT 系列高效液相色谱仪； 色谱柱：Diamosil C18 (5u, 150×4.6mm)； 流动相：1%醋酸-乙腈（75：25）； 流速：1ml/min； 检测波长：245nm 四 含量测定 1．对照品溶液配制 取干燥至恒重的头孢西丁对照品适量，精密称定后加磷酸盐缓冲液（pH=7.1）溶解制成每1ml中含0.mg的溶液，即得。mg，精密称定，置50 ml 量瓶中，用磷酸盐缓冲液（pH=7.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，过微孔滤膜（0.45μm）,即得。 3． 测定法 分别精密吸取对照品溶液与品溶液各20μl，注入液相色谱仪，，即得。”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。 首先打开仪器上的排空阀（open方向旋转180度）。然后点击仪器面板上“purge”钮开始清洗5个流路3分钟，自动进样器25分钟，然后在分析参数设置页中设置流速，检测波长，柱温，停止时间等。在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。 分析方法的保存：选择file－save method file as－选择保存路径－取名保存文件 系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作、柱温箱开始升温。 进样准备 将样品瓶放入自动进样器中 观察基线及柱压，待基线平直（－5～30mv），压力稳定（0.5Mpa）时方可进样。 5. 进样 点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。然后填入进样瓶号（vial），架号（tray），进样体积（injection volumn）。 填完后点击“start”，仪器开始自动进样分析。 6. 数据文件的调用及查看 点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。 打开文件有哪些信誉好的足球投注网站器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。 7.数据文件中图谱及数据的打印 报告模板的制作：在助手栏中选择“report format”键，出现空白页后，点击sample information、LC/PDA Chromatogram、LC/PDA Peak Table等快捷按钮，在空白页中拖曳鼠标，即可依次加入相应的统计信息。 报告模板的保存：File－save report format file as－桌面lcsolution－templates 数据文件的打印：在文件有哪些信誉好的足球投注网站器中选择欲打印的数据文件，拖曳至报告模板中，然后点击助手栏中的打印按钮即可。 附件二 液 相 维 护 须 知 流动相及样品必须用0.45um的滤膜过滤（水相用水膜，有机相用有机膜）。 RINSE液可以用甲醇。A、B流路在使用前必须purge 3min以排气泡。 自动进样器在每次使用前必须purge 25min以保证进样精度。 柱子在进样前必须用流动相充分平衡，一般40min 左右。待基线及柱压稳定后方可进样。 柱子在每天分析结束后必须用甲醇冲洗干净（一般30min）。如果流动相中含有盐、酸等成分，则冲洗柱子的程序为：水（40min）－甲醇（30min） 清洗瓶中的水应每天更换，最好加入10%的异丙醇。