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三种化合物清除自由基能力的高效液相色谱法研究 刘晓星，温普红，郑建斌 （西北大学分析科学研究所/陕西省电分析化学重点实验室，陕西西安 710069 ） 摘要 目的：采用离线柱前反应，分别建立了高效液相色谱 － 二极管阵列 － 电化学联用 技术研究没食子酸、鞣花酸和槲皮素清除自由基能力的新方法，并将其用于中草药地锦草清 除自由基能力的研究。方法：采用 Gemini - C18 110A （250 mm × 4.6 mm,5.0 µm ）色谱柱； 以甲醇（A ） - 2%醋酸（B ）为流动相，采用梯度洗脱：0 min 时A - B (30 :70)，7 min 时 A - B （30 :70 ），17 min 时A - B （75 :25 ），22 min 时A - B （90 :10）；流速为0.8 mL·min-1 ； 柱温为 25 ℃；二极管阵列检测波长为254 nm ；单安培检测工作电位为0.7 V 。结果：没食 子酸、鞣花酸及槲皮素的线性范围分别为 2.1 ~ 63.3 μg·mL-1 （r=0.9993 ），7.7 ~ 230 μg·mL-1 （r=0.9990 ），2.1 ~ 64.1 μg·mL-1 （r=0.9990 ）；三种化合物的回收率分别在 96.8 ~ 105% （RSD ＜2.3% ），97.9 ~ 104% （RSD ＜2.1% ），97.8 ~ 102% （RSD ＜2.8% ）范围内；没食子酸、 鞣花酸、槲皮素对二苯代苦味肼基自由基的清除率和中药材地锦草的平均清除率分别为 48.02 ，69.17，68.06 和 73.44% 。结论：地锦草和三种化合物清除自由基的能力从强到弱的 顺序为：地锦草＞鞣花酸＞槲皮素＞没食子酸。为测定地锦草抗氧化能力提供了依据。 关键词： 自由基 地锦草 没食子酸 鞣花酸 槲皮素 高效液相色谱法 电化学 Investigation of radical scavenging capacity of 3 compounds by HPLC LIU Xiao - xing, WEN ZHENG Jian - bin (Institute of Analytical Science/Shaanxi Provincial Key Laboratery of Electroanalytical Chemistry， Northwest University ，Xi’an 710069 ，China) Abstract Objective: To established an HPLC − DAD − ECD with off−line pre−column derivation new method for investigation of radical scavenging capacity of gallic acid, ellagic acid and quercetin，respectively. Moreover, the new method was used to investigate radical scavenging capacity of Herba Euphorbiae humifusae . Method: The samples were separated on Gemini − C18 110A column (250 mm × 4.6 mm,5.0 µm) by gradient elution with methanol −2% acetic acid (0 min, 30:70, 7 min, 30:70, 17 min, 75:25, 22 min, 90:10) as the mobile phase at a flow rate of 0.8 -1 mL·min . The DAD detection was used at 254 nm and 25 ℃, and the ECD d