犬腺病毒病PCR临床诊断研究.pdfVIP

反转录酶的转录效率、环境因素等使得单独使用RT-PCR的方法进行CD的诊断的敏感性不 高。嵌套式PCR在敏感性和特异性方面要高于常规的PCR[51，为此本文设计3条引物，采 用半嵌套式PCR方法对CDV进行检测。 本文设计的引物从犬五联疫苗中只扩增出CDV特异性基因片断，没有扩增出CPV， CAV-2，CPi的基因片断，说明该引物的特异性较强。临床初步应用以及同琼脂扩散试验、 免疫胶体金检测方法对比结果显示：虽然免疫胶体金检测试剂盒检测所用的时间较短，检测 较为方便，但是半嵌套式PCR检测的阳性检出率高于免疫胶体金检测试剂盒，半嵌套式PCR 方法的敏感性较高。在临床实践中为了快速的对疾病作出诊断可以首先利用免疫胶体金检测 试剂盒进行诊断，但对于免疫胶体金检测试剂盒未能诊断出的可疑病例最好使用半嵌套式 PeR方法进行最终的确诊。 本文建立的琼脂扩散试验的阳性检出率和免疫胶体金检测方法的阳性检}i；率相同，说明 琼脂扩散试验同样可以应用于CD病例的临床诊断。 犬腺病毒病的PCR临床诊断研究 姚大伟1，翟晓虎2，杨德吉1+ (1．南京农业大学动物医学院，江苏南京210095；2．江苏畜牧兽医职业技术学院宠物繁育 中心江苏泰州225300) 摘要：建立犬腺病毒(CAV)PeR检测方法，对PeR产物进行序列分析和限制性片段长度多态性分 析从而区分犬传染性肝炎和犬传染性支气管炎，将该方法应用于临床诊断。根据CAVol和CAV-2基因组核 41Ibp扩增产物基因序列限制性内切酶NcoI酶切位点的差异将二者进行区分。对59份临床样品进行检测， 结果共检测出5份犬传染性肝炎病例。初步Ihii床检测结果证明该方法具有快速、准确、灵敏度高的优点， 完全适用于犬传染性肝炎和犬传染性支气管炎的临床诊断。 关键词：聚合酶链式反应；犬传染性肝炎；犬传染性支气管炎；临床诊断 onClinical ofInfectiousCanine Study Diagnosis Hepatitisby ChainReaction Polymerase Yao Daweil，Zhai Xiaohu2，YangDejil+ p ofVeterinary Agricultural College Medicine，NanjingUniversity,Nanjing，210095) ChainReactiontestmethodforCanineAdenovirusand Polymerase Abstract：Development differentiationof baseon ofrestriction species analysis fragmentlengthpolymorphism．Twopairs of were to 441 and ofthe generalprimes designedamplifybp fragment．Alignment 205bp 作者简介：姚大伟(1979一)，男，山东枣庄人，在读博士研究生，从事兽医临床应用分子生物学研究， 12 nucleotide of41 PCR betweenCAV-1and iS a sequencelbp products CAV-2，there NcoIrestrictionsiteinw