多浆旱生植物霸王Actin基因片段的克隆及序列分析.pdfVIP

生物技术通报 年第 期 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2008 2 多浆旱生植物霸王Actin基因片段的克隆及序列分析 伍国强 席杰军 包爱科 王锁民 (兰州大学草地农业科技学院,兰州 ) 730000 摘 要: 根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以霸王叶片总RNA为模板,采用RT-PCR 的方法扩增出Actin基因片段并克隆到PUCm-T载体。阳性克隆经PCR鉴定后进行测序,序列分析结果表明:该片段长 598bp,编码 198个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的Actin基因序列的同源性均在82%以上,与其他肌动蛋白的氨 基酸序列的同源性达91%以上。 关键词: 霸王 Actin基因 克隆 序列分析 CloningandSequenceAnalysisofActinGeneFragmentfrom theSucculentXerophyteZygophyllumxanthoxylum WuGuoqiang XiJiejun BaoAike WangSuomin ( ) SchoolofPastoralAgricultureScienceandTechnology,LanzhouUniversity,Lanzhou730000 : Abstract Degenerateprimersweredesignedbasedontheconservedsequencesoftheactingenesfromotherplants.Total RNAwasextractedfromtheleavesofZygophyllumxanthoxylum.Actingenefragmentwasobtainedbyreversetranscription polymerasechainreaction(RT-PCR)andclonedintoPUCm-Tvector.ThepositivecloneidentifiedbyPCRwassequenced.The sequencingresultrevealedthattheactingenefragmentfromZygophyllumxanthoxylumcontains598bp,encodingaproteinof198 aminoacids.HomologycomparisonwithotherplantsactingenesequencesintheGenBankshowsthatitsharesover82% nucleotidesequencehomologyand91%aminoacidsequencehomologywithotherplantsactins. Keywords: Zygophyllumxanthoxylum Actingene Cloning Sequenceanalysis 肌动蛋白( )是真核生物中普遍存在的一种重要的蛋白质,是构成细胞骨架和肌肉肌小节的主要 actin 成分,执行着重要的生理功能,如参与细胞分裂、细胞运动、细胞形状变化、胞内物质运输以及细胞内信号 传导等[1~3]。由于Actin基因在各种组织中恒定表达,因而常被作为一种重要的看家基因以比较不同来源的 目的基因表达量的差异。迄今为止,已在许多高等植物,如拟南芥 ( )、水稻