用醇沉法纯化大豆异黄酮.pdfVIP

120 论文选集 中国粮油学会油脂专业分会第十四届学术年会 用醇沉法纯化大豆异黄酮 王 哲1’2，张博坤2，田娟娟2白志明1 (1．黑龙江双河松嫩大豆生物工程有限责公司，150001哈尔滨市南岗区巴陵街158号； 2．黑龙江省粮食科学研所，150001哈尔滨市南岗区巴陵街158号) 摘要：为了达到提高大豆异黄酮纯度的目的，本文研究了采用醇沉法除去极性较大的低聚糖 等杂质，使大豆异黄酮得到初步的纯化，进一步采用极性较大的水进行抽提，除去提取液中残余的 水溶性杂质从而纯化大豆异黄酮。此方法不仅保证了大豆异黄酮的质量而且节省溶剂，操作方便 快捷。不对环境造成污染。 关键词：大豆粕；醇沉；水抽提；大豆异黄酮 大豆异黄酮生产过程中，提取液中含有糖类、 95％乙醇(食用乙醇)，蒸馏水(自制)。 皂苷、少量的蛋白质等水溶性杂质，影响大豆异黄 1．4检测方法 酮产品的纯度。众所周知，大豆异黄酮组成成份中 大豆异黄酮测定法，依据企标Q／HSS01—2002 苷和苷元都易溶于乙醇溶液，而游离的苷元难溶于 (HPLC法)。 水，苷类一般可微溶于冷水。根据这个性质，向提取 1．5实验方法 液中加入高浓度乙醇，此时，混合物中异黄酮处溶 用70％的食用乙醇在60℃的条件下浸提低温 解状态，糖类等水溶性杂质被析出来，从而使提取 脱溶豆粕，料液比1：6、3rain，复浸一次，合并萃取 液得到初步纯化。进一步采用极性较大的水抽提异 液，回收乙醇，得到的提取液加入95％的乙醇，搅拌 黄酮相，使提取液中残余的水溶性杂质与大豆异黄 后，静止沉淀，取上清液离心处理，沉淀物再经蒸馏 酮分离开来，从而达到了提高大豆异黄酮纯度的目 水洗涤，然后进离心分离，得到的沉淀物低温烘干， 的。作为中药领域醇沉法的一种改良，该法首次将 用HPLC法测定大豆异黄酮含量。 醇沉一水剂法应用于大豆异黄酮提纯，为国内工业 1．6工艺流程 化生产大豆异黄酮的企业提供了一条降低生产成 豆粕一乙醇萃取一回改乙醇一提取液一醇沉一上清 本的途径。 液一回收乙醇一沉淀分离一沉淀物一水洗涤一离心分离一 1材料与方法 沉淀物一干燥一高纯度大豆异黄酮 1．1材料 2结果与讨论 低温脱脂豆粕，黑龙江双河松嫩大豆生物工程有 2．1对比实验 限责公司；大豆苷元(daidzein98％)，染料木素(genis— 醇沉工艺与大孔树脂法的比较，用S一8树脂柱 tein 99％)，大豆苷(daidzin 98％)，大豆黄苷(glycitin 做对照，进行3次重复实验，结果见表1、表2。 99％)，染料木苷(genistin97％)，美国Sigma公司。 表1 S一8大孔树脂法实验结果 1．2仪器设备 提取液体提取液浓干物质重异黄酮含异黄酮得 LCl0A高效液相色谱仪；101一OA型电热鼓风 积0D 度(糖国 量(亩 量(％) 率(％0) 1