肺炎链球菌的检验技术及其进展探讨.pdfVIP

2011年6月 141 肺炎链球菌的检验技术及其进展探讨 王东霞’惠小夏’ 摘要：近年来，肺炎链球茵菌株对青霉素、头孢等多种抗生素均产生了广泛的较强的耐药性，引起了国内外的重视。肺炎链球菌耐药 已经成为一个迫切需要解决的健康问题。本文探讨了肺炎链球茵的检验技术及其进展。 关键词：肺炎链球茵；检验；进展 中图分类号：R563．1 文献标识码：B 文章编号：1006加979(2011)12一014l-0l 肺炎链球菌(s№pt000ccu8pneumoniae)简称肺炎球菌，是20姗，证明其对青霉素和B一内酰胺类药物敏感物耐药性；若抑 1881年首次由巴斯德及G．M．stembe嚷分别在法国和美国分离出菌环19mm，则须进一步检测其对青霉素、头孢曲松或头孢他啶 来。肺炎球菌茵体似矛头，呈短链状排列或成双排列的球菌，革兰 的耐药性。同时，对于非中枢神经系统分离的菌株还应进行红霉 氏阳性，绝大多数兼性厌氧，偶有专性厌氧。肺炎链球菌的主要致 素、复方磺胺药物敏感性的测定。阿奇霉素、克拉霉素等新大环内 病物质是肺炎球菌溶血素和荚膜。其荚膜具有抗原性，是肺炎链 脂类药物的敏感性则可通过红霉素药敏试验结果推知，而不必进 球菌分型的依据。在化脓性球菌中，肺炎球菌的致病力仅次于金 行常规的检测。自1965年波士顿报道了首例耐青霉素肺炎链球 黄色葡萄球菌，它主要引起大叶性肺炎、气管炎、中耳炎、脑膜炎， 菌以来，世界各地不断有耐药性肺炎链球菌的菌株被发现，虽然 也可导致胸膜炎、心内膜炎和败血症等疾病llJ。近年来，越来越多各地报道的耐药率和检出率不尽相同，但是一个总的趋势就是， 的国家和地区出现耐药性肺炎链球菌菌株的报道，严重威胁着肺 肺炎链球菌耐药性正在逐年上升。临床上和实验室应该特别注重 链感染的临床治疗，已成为一个亟待解决的健康问题。本文对肺 肺炎链球菌耐药性的检测和使用抗生素进行治疗。 炎链球菌的检验方法技术和研究进展进行了综述。 3分子流行病学研究方法 1药敏试验 近年来，由于传统的细菌药敏试验和荚膜血清学分型具有一 1．1微量稀释法：该法是美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)定的局限性，分子流行病学研究方法被作为一种重要的补充手段 推荐的肺炎链球菌药敏试验的参考方法闭。该法主要使用经过离 用于肺炎链球菌感染和耐药性的分析中嘲。主要包括以下三个方 子校正的M—H肉汤+2％。5％的溶血马血作为培养基的，然后将面，①BOx—PcR：它是肺炎链球菌染色体上的一段重复序列，呈 抗生索稀释后加入培养基中。将在羊血平板上的菌落制备菌液， 现高度保守性，由三个亚单位组成．分别为A、B、C。其中以BOxAl 以O．5浊度分装微量板。在35℃普通条件下培养24h后，人工判为引物的PcR检测法被广泛应用。②核酸分子杂交：该技术又被称 断结果。具体MIC见NccIJs的判定标准。 为核糖体分型。首先利用限制性内切酶切割DNA，电泳后将DNA 1．2纸片扩散法：NCCLs推荐使用的纸片法药敏试验闭，主要使用转移到尼龙膜上，使其与被标记的BOx片段进行杂交，从而比较 羊血平板。以0．5浊度的菌液接种平板。对于临床分离株的药敏DNA片段的同源性。③限制性片段长度多态性分析(RFLP)：该法 试验，C0：是必备的环境。平板应于35℃条件下在5％的CO：中培与上法有类似之处，首先利用限制性内切酶切割DNA，经电泳分离 养24h后进行测量，从正面量取。抑菌环的大小和质控标准详见后，直接比较各菌株的DNA指纹，从而判断其同源性。 NcCLs的规定。纸片扩散法的优点是简单方便，对非B一内酰胺药 肺炎链球菌耐用性的增加与临床上抗生素治疗的不合理密 物的重复性、准确性均较高?但是在应用于青霉素和头孢类抗生 切相关。实验室应加强对肺炎链球菌耐药性菌株进行检测和监 素时准确性明显降低。 测，协助临床医生在治疗肺链时能合理选择药物，同时有助于控 2肺炎链球菌的耐药性检验 制社区获得性和医院获得性肺炎链球菌的耐药性，早日消灭耐药 目前有很多实验室在对血液、脑脊液等体液分离得到的肺炎 性肺炎链球菌的感染。 链球菌耐药性测定时