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《生物化学与分子生物学实验》实验技能点分解如下: 技能 观测项目 观测点 称量技术 电子天平 1、调整地脚螺栓高度,使水平仪内空气汽泡位于圆环中央。接通点源,按开关键直至全屏自检。预热30分钟。为取得理想的测量结果,天平应保持在待机状态。使用除皮键,除皮清零。放置样品进行称量。天平应一直保持通电状态,不使用时将开关键至待机状态,使天平保持保温状态,可延长天平的使用寿命。在对天平清洗之前,将天平与工作点源断开称量废弃物用刷子小心去除在清洗时,不能使用强力清洁剂(溶剂类等),应使用中性清洁剂(肥皂)浸湿的清洁布擦拭(擦拭不要让液体渗到天平内部),然后使用干净的清洁布拭干。称量前调节螺丝达平衡若不平衡,应调节螺丝使之平衡。、被称量物要放在左盘中,砝码要放在右盘中。??? 、取砝码时,切不可用手拿取,而必须用镊子夹取。?? 、添加砝码时,应先夹质量大的砝码,然后在夹质量小的砝码(最后再移动游码)。、被称量的药品不能直接放在托盘上(可在两个托盘上各放一张大小相同的纸片,然后把被称量的药品放在纸片上,潮湿或具有腐蚀性的药品必须放在表面皿或烧杯里称量)。??、称量完毕后,应把砝码放回砝码盒中,把游码移回零处,使天平恢复原来的状态。???使用前要检验是否漏水。程序是:加水→倒立,观察→瓶塞旋转180°→倒立,观察。容量瓶不能用于溶解溶质,更不能用玻璃棒搅拌。因此溶质要先在烧杯内溶解,然后再转移到容量瓶中。不能将热的溶液转移到容量瓶中,更不能给容量瓶加热。如果溶质在溶解时是放热的,则须待溶液冷却后再移液。配制一定体积的溶液,须选用与该溶液体积相同规格的容量瓶。常用的有50mL、100mL、250mL、500mL、1000mL等规格。5、观察所加液体是否达容量瓶的刻度线,一定要平视,使液面的最低点刚好与刻度线相平。6、如果加水定容时超过了刻度线,不能将超出的部分再吸走,必须重新配制。因为吸走一部分液体虽然溶液的体积达到了要求,但吸走的部分液体带走了一部分溶质,使所配溶液的浓度偏低。7、容量瓶通常不用于贮存试剂,因此,配制好的溶液要倒入试剂瓶中,并贴上标签。 2、调整液面时移液管是否垂直(要垂直)1分 3、调整液面时眼光的位置(视线、液面、标线均应在同一水平面上)2分 4、放液时移液管尖是否与容器接触(管尖要与容器壁触碰)2分 5、液体流完后,是否有再接触容器15秒(要保持15秒的触碰,使其流尽)1分 6、是否吹管(无需吹管)1分 7、移液管使用前的洗涤(除分别用洗涤液、水洗涤外,还需用少量被移取的液体洗涤) 1分 8、使用前的洗涤方法:先慢慢地吸入少量洗涤的水或液体至移液管中,用食指按住管口,然后将移液管平持,松开食指,转动移液管,使洗涤的水或液体与管口以下的内壁充分接触,再将移液管持直,让洗涤水或液体流出,如此反复洗涤数次1分 移液枪使用 移液枪使用 1、量程的调节:由大调小和由小调大(如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。) 2分 2、调最大、最小量程时,是否超过量程范围(将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪) 1分 3、枪头(吸液嘴)的装配(将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。错误操作:使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。) 1分 4、移液时的操作姿势:吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米 1分 5、移液的方法: 一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。 二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。 4分 6、移液器的放置: 将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。 移液器枪头内具有液体时,移液器的拿放。(不得水平放置或倒置) 1分 沉淀技术 有机溶剂沉淀 1、操作温度(低温下操作,冰盐浴中进行) 1分 2、有机溶剂的选用(能与水互溶) 1分 3、有机溶剂的加入(缓慢且不断搅拌以免局部过浓) 1分 4、盐浓度(溶液中盐浓度以不超过5%为宜,少量的中性盐对

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