去甲斑蝥素纳米粒药代动力学LC-MSMS代谢物论文.docVIP

去甲斑蝥素纳米粒药代动力学LC-MS/MS代谢物PVP包衣去甲斑蝥素—壳聚糖纳米粒的制备及动物体内药动学研究 　　【摘要】 目的本文研制了一种新颖的剂型PVP包衣去甲斑蝥素-壳聚糖纳米粒(polyvinylpyrrolidone-coated norcantharidin chitosan nanoparticles, PVP-NCTD-NPs)，以提高去甲斑蝥素(NCTD)的生物利用度以及降低其肾毒性;同时建立高效液相色谱(HPLC)法和高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法测定生物样品中NCTD浓度，旨在研究PVP-NCTD-NPs在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程，为其进一步研究与开发提供科学依据。方法(1)等温吸附法考察载体壳聚糖(CS)浓度、NCTD浓度以及pH等因素对包衣纳米粒载药特性的影响，推断其吸附规律;原子力显微镜(AFM)验证纳米粒形态学特征。(2)正交设计优化PVP-NCTD-NPs的制备;动态激光散射法测定平均粒径与粒度分布;红外光谱(FT-IR)、X-射线衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)对其进行表征;并考察纳米粒在体外不同pH介质中的释药性质。(3)大鼠血液中NCTD含量LC-MS/MS测定方法的建立及药代动力学研究：以高氯酸和甲醇双重沉淀生物样品中蛋白质，多重反应离子(... 更多还原 　　【关键词】 去甲斑蝥素; 纳米粒; 药代动力学; LC-MS/MS; 代谢物; 　　中文提要4-6 　　Abstract6-8 　　引言14-23 　　一. 去甲斑蝥素简介14-15 　　二. 缓、控释靶向制剂简介15-19 　　三. 血药浓度监测方法学研究进展19-22 　　四. 确定本课题的主要考虑22-23 　　第一章 PVP 包衣去甲斑蝥素纳米粒吸附机制研究23-33 　　仪器与试药23-24 　　方法与结果24-32 　　一、 去甲基斑蝥素 HPLC 体外分析方法的建立24-25 　　1. 色谱条件24 　　2. 标准曲线24 　　3. 精密度24-25 　　4. 回收率25 　　二、 吸附方式的探讨25-32 　　1. 纳米粒的制备方法25 　　2. 两种加入药物方式25-26 　　3. 吸附因素的考察26-32 　　讨论与小结32-33 　　第二章 PVP 包衣去甲斑蝥素-壳聚糖纳米粒的制备与优化33-43 　　仪器与试药33-34 　　方法与结果34-41 　　一、 纳米粒制备的工艺优化34-40 　　1. PVP-包衣纳米粒的制备方法34 　　2. 纳米粒的质量评价34-35 　　3. 单因素优化纳米粒的制备工艺35-38 　　4. 正交设计优化纳米粒制备工艺38-40 　　二、 优化的纳米粒制备工艺40-41 　　1. 优化的制备工艺40 　　2. 优化工艺制备的纳米粒的质量评价40-41 　　3. 回收率的测定41 　　讨论与小结41-43 　　第三章 纳米粒的体外释放特性及其表征43-50 　　仪器与试药43 　　方法与结果43-49 　　一、 纳米粒胶体的体外释放43-45 　　二、 纳米粒冻干粉的体外释放45-46 　　三、 纳米粒结构的表征46-49 　　1. 红外光谱(FT-IR)分析46 　　2. X-射线衍射(XRD)分析46-47 　　3. 差示扫描量热(DSC)分析47-48 　　4. PVP-NCTD-NPs 的扫描电镜图(SEM)48 　　5. PVP-NCTD-NPs 的原子力显微镜图(AFM)48-49 　　讨论与小结49-50 　　第四章 PVP-NCTD-NP 在大鼠体内的药动学研究50-59 　　仪器与材料50-51 　　方法与结果51-58 　　一、 体内含量测定方法的建立51-55 　　1. 色谱与质谱条件51 　　2. 标准品与内标溶液的配制51 　　3. 血浆样品处理与测定51 　　4. 标准品的质谱分析51-52 　　5. 标准曲线的制备52-53 　　6. 方法专属性考察53-54 　　7. 回收率及精密度考察54-55 　　二、 实验设计及统计学处理55-58 　　1. 实验设计55 　　2. 药物浓度-时间曲线55-56 　　3. 药动学参数的计算以及模型拟合56-58 　　讨论与小结58-59 　　第五章 PVP-NCTD-NP 在小鼠体内分布及肝靶向作用59-66 　　仪器与试药59-60 　　方法与结果60-64 　　一、 体内含量测定方法的建立60-61 　　1. 标准品储备液的配制60 　　2. 生物样品的处理方法60 　　3. 分析方法的专属性60 　　4. 标准曲线的制备60-61 　　5. 回收率与精密度61 　　二、 组织分布研究61-64 　　1. 实验设计61 　　2. 组织分布图61-62 　　3. 靶向性研究