GB/T 25876-2010牛早期胚胎性别的鉴定　巢式PCR法.pdf

ICS65．020．30 B43 a亘 中华人民共和国国家标准 GB／T25876—2010 牛早期胚胎性别的鉴定 巢式PCR法 MethodofnestedPCRforsexidentificati帆ofcattle early embryo 201 201 1—01-10发布 1-06一01实施 宰瞀髁鬻瓣警糌瞥鐾发布中国国家标准化管理委员会促19 标准分享网 免费下载 25876—2010 GB／T25876—2010 牛早期胚胎性别的鉴定巢式PCR法 1范围 本标准规定了牛早期胚胎性别鉴定的巢式PcR方法。 本标准适用于奶牛和肉牛胚胎或胎儿的性别鉴定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3．1 n幅ted n扯tion 巢式PcR polymera鸵chain 生扩增产物，此产物在内引物的存在下，作为DNA模板，进行第二轮扩增。 3．2 职Y基因舰y g∞e 哺乳动物Y染色体上决定雄性性别的基因。 3．3 珊B基因 日BB gene 卢珠蛋白基因，位于常染色体上。 4原理 利用巢式PcR反应的敏感性高和特异性强的特性，对少量胚胎细胞的sRy基因片段进行扩增，以 HBB基因的扩增作为阳性参照，电泳检测PcR扩增产物，根据扩增产物电泳条带鉴定胚胎性别。 5引物 7 3 SRyl5’CTACTCCCCAACCGTCAGAAC 3’ 5’AGCCCAAACCCATCAACCTA 3’ SRY25’CCAGGGAACTGCTTGGGTA 3’ 5’TGCTTCTCCACTTAGGCTCAA 3 HBB5’TATCCCACTTACAAGGCAGGTT