pIRESGFP前脑啡肽原载体在体内外的表达及生物学效应.pdfVIP

第30卷 第 6期 新乡医学 院学报 V0l_30 No6 2013年 6月 JournalofXinxiangMedicalUniversity Jn．2013 ·435 · !。 。。’。。。’ 。’ ’ 。。。。。 。。’ 。’。。’。。。。’。。’。。’。。’。。。。?。’。。。。’。。’。。’。’ ’。。 。’ 。。。。。’。。。’。。’。。 ：。’。。’。‘’ ’。。。’。。。’ 。。’。 。’。： 本文引用：刘雪琴，胡伊乐，郭绍芳，等．plRES—GFP一前脑啡肽原载体在体内外的表达及生物学效应 [J]．新乡医学院学报，2013，30(6)： ] 、 ： 435437． 。。◆ 。 )◆ l1． 1]◆ 。。· )·。。 ·。 。·。。· 。。·。o ◆ 。n · ·。_ · 一 ·()。·。。 ◆ () · 、ll· 。·。一◆ ()¨I· )◆ 。。◆ (j。◆ 。。 ·。。· I)(◆ 。。·。(、◆ J ◆ 。 ·(H)·。。 ◆ 。。◆ 、。·t · (】◆ 叭 、·。 ()·。 ◆ () )◆ ( · · m · pIRES-GFP一前脑啡肽原载体在体 内外的表达及生物学效应 刘雪琴 ，胡伊乐 ，郭绍芳 ，任亚丽 (1．济源职业技术学院护理系，河南 济源 471000；2．河南科技大学医学院解剖学教研室，河南 洛阳 471003； 3．洛阳中心医院药剂科 ，河南 洛阳 471003) 摘要 ： 目的 检测plRES—GFP一前脑啡肽原载体在体内外的表达 ，以探索脑啡肽基因镇痛的生物学效应与临床 应用的可行性。方法 将大鼠前脑啡肽原基因与绿色荧光蛋 白真核质粒连接构建重组质粒，体外转染机体细胞，通 过阳性细胞绿色荧光表达的强弱与细胞上清液脑啡肽水平的放射免疫测定 ，观察重组质粒在细胞 内的合成与表达； 大 鼠蛛网膜下腔注射重组质粒 ，观察大 鼠热痛阌值的变化，确定重组质粒在机体细胞内合成外源性脑啡肽 的生物学 活性。结果 体外试验表明重组质粒转染24h后COS-7细胞内开始有绿色荧光表达，48h达高峰，持续27d开始减 弱 ，动物实验大鼠热痛阈值的变化与体外试验基本相符。结论 重组质粒在机体细胞内合成的外源性脑啡肽具有与 内源性脑啡肽相同的生物学活性 ，可以作为一种长效的基因镇痛方法应用于临床。 关键词： pIRES—GFP一前脑啡肽原 ；镇痛；基因治疗 ；鞘 内注射 中图分类号：Q784 文献标志码：A 文章编号：1004—7239(2013)06—0435—03 BiologicaleffectandexpressionofpIRES-GFP-preproenkephalinvectorin vivo andvitro LIU Xue—qin ，‘HU Yi—le ，GUO Shao—fang ，REN Ya—li (1．TheNursingDepartmentofJiyuanVocationalandTechnicalCollege，Jiyuan471000，HenanProvince，China；2．Department ofAnatomy，theMedicineCollegeofHenanUniversityofScienceandTechnology，Luoyang471003，HenanProvince，China；3． DepartmentofPharmacy，LuoyangCentralHospital，Luoyang471003，HenanProvince，China) Abstract： Objective TodetecttheexpressionofpIRES—GFP—preproenkphalin(PENK)vectorinvivoandvitroinor— dertoresearchthebiologicaleffectandthefeasibilityofclinicalapplicationofenkephalingene．M ethods Recombinantplas— midwasconstructedbyconne