液相色谱_质谱联用方法用于严重急性呼吸系统综合症冠状病毒结构蛋白质的研究.pdfVIP

液相色谱_质谱联用方法用于严重急性呼吸系统综合症冠状病毒结构蛋白质的研究.pdf

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32 ( FENXI HUAXUE) 4 2004 4 Chinese Journal of Analyti al Chemistry 415~ 420 研 究报 告 张养军 王京兰 蔡 耘 应万涛 郝运伟 李 蕾 李晓海 戴舒佳 代景泉 贺福初 钱小红* ( , 100850) 王 杰 开华 ( , 100850) - SARS , NS M 3 SARS , N N , N : N , , , , , , , , 1 2002 11 SARS( severe a ute respiratory syndrome) , WHO , [ 1] [2~ 4] , , , , , , , , SARS , Stangding[5] N S , , , SARS , , SARS , SARS , 2 2. 1 230 ( ) , P230 , UV230 EC2000 V1. 0; FC95 ( ) ; ( CapLCESIQTOF MS/ MS, QTof mi roTM, Mi romass, Man hester, UK) , MassLynx (No. 2001CB510201) ( No. ( No. 2001AA233031, No.2202BA711A11) 416 32 v. 3. 5 ; / (MALDITOF MS, REFLEXTM , Bruker ) ; SARTORIUS BP211D ; Millipore ( Millipore ) ; ( HPLC , J. T. Baker ) ; ( iodoa etamide, ACROS ) ; ( trypsin, bovine pan rease) ( DTT , dithiothreithol, Promega ) ; ( BSA) Sigma ; 2. 2 SARS , 70 2 h , 4000 g , 3000 , Bradford , , : 1. 5 mL , 25 L 8. 0 mol/ L , DTT 10 mmol/ L, 37 4 h, ; DTT 51, 1 h, DTT ; 50 mmol/ L 1.0 mol/ L, 150 , 37 10~ 16 h, 2. 3 50 mm4. 6 mm i. d. Hypersil C , 5m, 30 nm 18 A 5% 0. 1% ; B 95% 0. 1% ; 1. 0 mL/ min; 280 nm; : 10% ~ 90% B, 60 min, 90% ~ 100% B, 5 min, 100% B 5 min , 100% A ; , ( SCX) 15 mm 500 m i. d. , BioXSCX, 5m; 150 mm75 mm i. d. , PepMap C18, 3 m , 10 nm ( LC Pa kings, Amsterdam, The Netherlands) ; 2. 0 L/min, 0. 15 L/ min ; C 30 L/ min ( 5 mm 320 m i. d. , PepMap C18, : 3 m, : 10 nm, LC Pa k

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