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抗对虾白斑综合症病毒单链抗体!#$ 基因在毕赤酵母中的分泌表达
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杨 毅 ，张 敏 ，袁 丽 ，张晓华 ，戴和平
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$ 中国科学院水生生物研究所，武汉 HG##I!
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摘 要 为了将可中和对虾白斑综合症病毒（ ）的单链抗体 在酵母中实现表达，以原核表达载体 噬菌粒为模
XDD% W$UG 3$G
板，设计带有 9$+Y 和 =0( / 酶切位点的特异性引物，通过WF/ 方法扩增W$UG 基因。经过酶切、连接反应将该基因连入大
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肠杆菌 酵母穿梭质粒 上。重组质粒 经 线性化后，用电转化的方法转入毕赤酵母（
K 8WVF6Z 8WVF6ZK0E*W$UG .1, #0#+
） 中。通过 和 测序，挑选和鉴定阳性克隆。经甲醇诱导， 在酵母中获得分泌表达。 实验结果
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表明，酵母表达上清液中的单链抗体具有较高的XDD% 结合活性，而且其活性要高于大肠杆菌所表达抗体的活性。表达条件
优化后，单链抗体在酵母中最高表达量可达G#!,A\ S，为开展对虾被动免疫研究提
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