光动力法制备DC胶质瘤疫苗抗肿瘤作用的研究.pdfVIP

维普资讯 · 962· 肿瘤 2007年 12月第 27卷第 l2期 TumorVo1．27，No．12，December，2007 光动力法制备 DC胶质瘤疫苗抗肿瘤作用的研究 袁士翔 ，李方成 ，周何军 ，孙 希 ，阴慧娟 (1．中山大学第二附属医院神经外科，广州 510120；2．广州市第十二人民医院神经外科，广州 510620；3．中山大学医学院 寄生虫教研室 ，教育部热带病防治重点实验室，广州 510080；4．中山大学医学院生物医学工程系，广州 510080) [摘要] 目的：研究光动力法(photodynamictherapy，PDT)处理后，用酸洗法获取C6胶质瘤细胞的抗原肽，制备树突状细胞 (dendriticcell，DC)疫苗，诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte，CTL)在体外杀伤C6细胞的活性，以及PDT对C6 胶质瘤细胞免疫原性的直接影响。方 珐：自大鼠骨髓分离Dc前体细胞于体外诱导、扩增获得成熟Dc。C6细胞经PDT处理 后，对尚贴壁的细胞以酸洗法获取其表面抗原，从上清液中提取全细胞抗原，未作 PDT处理的C6细胞 以酸洗或冻融法提取 抗原。分别以这4种抗原致敏Dc，制成Dc疫苗接种sD大鼠后，取脾作CTL的体外杀伤活性测定。结果 ：用PDT处理后酸 洗法获得的抗原刺激Dc成熟的能力最强，它制备的Dc疫苗诱导的CTL的体外杀伤率最高，为(95．5±I．6)％，而光照后上 清组为(9O．2±2．4)％，酸洗组为(73．3±2．7)％，冻融组为(63．6±4．9)％，PBS对照组为0。结论 ：PDT能直接增强肿瘤细 胞的免疫原性，用酸洗法获取 PDT处理后的肿瘤细胞的抗原肽制备DC疫苗是一种有前景的新方法。 [关键词] 光化学疗法；癌症疫苗；树突细胞；T淋 巴细胞，细胞毒性 [中图分类号] R73-362 [文献标识码] A [文章编号] 1000-7431(2007)12-0962-06 Antitumorefficacyofphotodynamictherapy-generatedgliomavaccinefrom dendriticceHs YUANShi-xiang ，LIFang-cheng，ZHOUHe-ju ，SUNXi，YINHui-juan (1．DepartmentofNeurosurgery，SecondHos- pital，SunYat-senUniversity，Guna gzhou510120，China；2．DepartmentofNeurosurgery，GunagzhouNo．Peopleg12Hospital， Gunagzhou510620，China；3．DepartmentofParasitologyMedicalCollegeofSunYat-senUniversity，Gunagzhou510089，China； 4．DepartmentofBiomedicalEngineeringMedicalCollegeofSunYet-senUniversity，Gunagzhou510080，China) [ABSTRACT] Objective：ToinvestigatehtekillingactivityofcytotoxicTlmyphocytes(CTL~)stimulatedbydendriticcells(DCs) loadedwitl1C6gliomaantigenelutedbymildacidafterphotodynamichterapy(PDT)nadtestthedirectinfluenceofPDTonhteimmu- nogenicityofC6gliomacells．M ethods：Progenitors ofDCswereisolatedfrom ratbonemarrownadculturedwithratrecombinnatinter- leukin-4nadratrecomb inna tgranulocyte—macrophagecolonystimulatingfactortodifferentiatemature DC．AfterPDT，htesurfacenati— genpeptideswere elutedbymild