真核基因转录调控因子研究.pdfVIP

《生物工程进展)~1991，Vo1．11，No．4 真核基因转录调控因子的研究 敖 世 洲 (中国科学院上海生物化学研究所 上海) 生物的遗传信息全都编写在DNA分子上。在进行基因表达时，基因首先被转录成mRNA， 然后翻译成蛋 白质 这是生物学中最基本的规律 。正是在这个规律基础上，把从微生物到人 的各类生物统一成为一个大的生物系统。这种转录和翻译是忠实的，从而斑定了生物的遗传特 性。但是基因表达的程序、时间和位置是受不同层次的调控元件所控制的。这种控制机制不 仅决定 了基 因表达的数量，而且决定了基困表达的时、空秩序性。生物的正常生长、发育和 分化都是 由于基 因受控表达的结果。一旦这些调控讥制出现差错，就会导 致 各 种 病变，甚 至产生肿瘤 。 原核生物基因表达的控制机制研究得比较清楚。真核基因表达的调节控制 比原核逛专复 外由于TaphoA中部分DNA序列是 已知的，因此选择适当引物进行DNA序列分析，便 可对 TnphoA插入靶基因的位置进行定位。 已有不少报导说明，Q Interposon和Omegon—Km是用于选择插入突变，进行遗传分析的 有效工具(UXl4)。我们实验室已经用Q Interposon插入棒状杆菌质粒，对质粒中与质粒复制 有关的复制酶基因进行定位。TnphoA已经用来研究大肠杆菌(12)及多种革兰氏阴性细菌的膜 蛋 白，例如用TnphoA探针对vibriocholerae菌毛tcpA基因进行定位和阐明tcpA基因编码蛋 目的毒理效应(13j。我们也将TnphoA基因转座到棒状杆菌质粒的抗氯霉素基因上，说明由该 基因编码的蛋白质是一种处于细胞膜上的膜蛋 白。 参 考 文 献 1． Kleckner，N etalJ． M ol Bio1 ． ， 116：125--159(1977) 2 Simon，R ，etalMethodsinF,nzymology．．118：640--6S9(]986) 3，Simon，R ．，etalBio／Technol：784--791(1983) 4．Prentki-P andH．M．KrlschGene29：3o3--313(198a) 5．zheng z．X (郑兆盎)etalNnclel~AcidsReseatch 9 6265--6278( 8j) 6．Fellay，R．，etalGerie52：l47—154(1987J 7．Fellay．R，，etalGene75：215--226fi989) 8．Frey，JandH．M．KrischGene36：143--150(1985) 9．Manoil，C andBeckwtthj． Science233 1403--1408(1986) 10．ChungNanChang．，etalGene44：121--125(1986) l1．Manen，D etalJournalofBacteriology17112：1201(1989) 12． M anoilt and Beckwith，J PNAS USA 8218129--8133， 0985) 13．TaylorIR．K In “GeneticsofBacterialDiversity。。P3L0Edited by Hopw0od， )【 A And Chater，K E(m89) I4．Mart|nez，E．，ct81TheEMBO {ournal9：1275--]281，(1990) 一 l7一 杂，是 目前分子生物学的研究热点之一。真核基因表达，在多层次，受多种因子协同调节控 制，调控的主要部位在基因的转录水平。关于真核基因转录调控的研究正集中在顺式作用元 件 (Cis—actinEelements)和反式作用因子 (ttans—actingfactors)，以及它们的相 互 作用等方面 RNA聚合酶 Ⅱ转录的编码蛋 白质的基因。其顺式作用元件包括转录起始位点及其上游约 30bp处的TATA box，上游几百bp处的CCAAT序列或GGGCGG序列 (GC box)，或其 他特异基因的调控序列。在基因的上下游远端 (1