家蚕马氏管免疫相关基因的研究.pdfVIP

国蚕学会第七届青年学术研讨会论文集 家蚕马氏管免疫相关基因的研究 1 1，2* 1 1 1,2 1,2 1,2 丁丽平 唐顺明 吴俊 王娜 裘智勇 赵巧玲 沈兴家 1 2 （江苏科技大学生物与环境工程学院，江苏镇江212018； 国农业科学院蚕业研究所，农业部蚕桑遗传改 良重点开放实验室，江苏镇江212018） 摘要：为了探讨家蚕幼虫马氏管的蛋白质组学及其免疫功能，本文借助蛋白双向电泳技术（2 －D ）对感染BmNPV 不同时相的家蚕幼虫马氏管蛋白进行分离，随后利用基质辅助激光解析电 离飞行时间质谱 （MALDI-TOFMS ）对其 15 个高丰度差异蛋白点进行质谱分析。结果表明:10 个蛋白点得到成功鉴定,其中的一个可信结果为家蚕一氧化氮合酶 （Nitric oxide synthase ；简称 BmNOS ）。由于诱导型BmNOS 是合成巨噬细胞免疫效应因子NO 的一种关键特异性蛋白酶， 故本文后期分别通过体内注射BmNPV 和LPS 两种诱导剂，分别采用半定量和实时荧光定量PCR 的方法，分别对感染组和对照组早期马氏管 BmNOS 的不同发育时期的表达进行了定量分析。 结果表明：BmNOS 基因经两种诱导剂处理后均呈现出3h 处理组表达量迅速递增，随后逐渐降 低并趋于一致的趋势，推测BmNOS 可能在家蚕马氏管的免疫 具有重要的生理作用。 关键词：家蚕；内生免疫；双向电泳；马氏管；BmNOS Primary research on innate immune related genes in Malpighian tubule from the silkworm Bombyx mori Liping Ding1 Shunming Tang1,2* Jun Wu1 Na Wang1 Zhiyong Qiu1,2 Qiaoling Zhao1,2 Xingj ia Shen1,2 ( 1college of Biotechnology and Environmental Engineering, Jiangsu University of Science and Technology, Zhenji ang Jiangsu 212018,China; 2 The Key Laboratory of silkworm and Mulberry Genetic Improvement, Ministry of Agriculture, Sericultural Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Zhenji ang Jiangsu 212018,China) ABSTRACT: In order to investigate the proteomics and immune function of the Malpighian tubules (MT) in silkworm, separated the proteins of MT using the Two- dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-D) which infected with BmNPV-EGFP. 15 spots that increased dramatically in the infected ones were excised and supplied to identify furtherly by means of matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectro