双指示剂法测定壳聚糖脱乙酰度.docVIP

双指示剂法测定壳聚糖脱乙酰度研究 蔡宏伟1 武汉大学430070) 摘要：针对传统酸碱滴定法无法消除壳聚糖样品碱的，提出在适当活化处理壳聚糖样品后以酚酞、甲基橙-苯胺蓝为指示剂，直接滴定壳聚糖样品的氨基进而计算得到壳聚糖脱乙酰度，方法简便快捷，结果更为可靠 关键词：壳聚糖；脱乙酰度；双指示剂法；残余碱 Determine deacetylation degree of chitosan through double indicator method Wang Chao1 ，Jiao Shi-ning1 ，Cai Hong-wei1 ( 1School of Sciences,Wuhan University of Technology ,Wuhan 430070,China) Abstract：etermine deacetylation degree of chitosan was studied by double indicator method . It overcomes the traditional method deficiency ,the influence of remaining acid or alkali in the sample. In this method, the chiotosan sample is first activated ,then phenolphthalein and methyl orange- aniline blue are used as titration indicator. Compare with traditional methods, It is fast and easy to use.The outcome is reliable. Key words: chitosan;deacetylation degree;double indicator;remaining alkali and acid 壳聚糖（Chitosan）是甲壳质（Chitin）经浓碱脱乙酰基后得到的衍生物，具有良好的生物相容性和生物可降解性，广泛应用于医药、食品、化妆品、轻工、印染、环保和生物工程等领域[1]。壳聚糖脱乙酰度（Deacetylation degree ，简称DD%）则是指壳聚糖多糖分子氨基上脱去乙酰基的百分比，其高低直接影响到壳聚糖的溶解度、絮凝能力、螯合金属离子能力和N-选择性酰化能力等物化特性，是鉴定壳聚糖产品质量的一个重要指标。 目前测定壳聚糖脱乙酰度的方法有酸碱滴定法[-4]、电位滴定法[]、紫外光谱法[]和NMR法[]等等，各有优缺点，其中的酸碱滴定法属于返滴定法，由于具有简便快速的特点，故而在工业生产中得到了广泛应用，但其明显不足是无法克服壳聚糖吸附的残余酸碱的影响。 为此本文提出采用双指示剂酸碱滴定法测定壳聚糖的脱乙酰度将壳聚糖样品适当活化处理后，分别以酚酞、甲基橙-苯胺蓝为指示剂，直接用HCl标准溶液滴定壳聚糖氨基含量，进而计算出壳聚糖脱乙酰度，方法简便快速，可消除壳聚糖样品残余酸碱的影响。 1 1.1 实验原理 壳聚糖是2-氨基-2-脱氧-β-D-葡糖（分子式C6H11NO4，分子量161）的聚合体，结构式由于壳聚糖表示）为高聚物分子，不溶于水，一般认为无法采用盐酸标准溶液直接滴定其氨基，然而我们发现如事先将壳聚糖样品溶于稀HCl，用NaOH溶液调节到pH10时（出现大量壳聚糖沉淀），再滴加HCl溶液到试液中，壳聚糖沉淀会随着pH的降低迅速溶解直至澄清透明，与未经酸溶的壳聚糖样品呈现截然不同的反应能力，化学反应活性大大增强。 tructure of chitosan 因此经过活化处理后，如的浓度不是太小，可保证cKa≥10-9，从而能满足壳聚糖生产现场分析的精度要求。滴定反应为： 仪器和试剂 PHS-2酸度计，pH复合电极，mL酸式滴定管，磁力搅拌器，恒温干燥箱。 NaOH标准溶液(0.10mol·L-1)，HCl标准溶液(0.10mol·L-1)，1g·L-1酚酞指示剂。 甲基橙-苯胺蓝指示剂：1g·L-1甲基橙与1g·L-1苯胺蓝以1:2（V/V）混合。 所用试剂皆为A.R级试剂。 壳聚糖样分别编号为样品、样品和样品。 实验方法 .1 返滴定法[] 准确称取0.25g左右壳聚糖样品于250mL锥形瓶中，加入0.10 mol·L-1HCl标准溶mL，在电磁搅拌器上搅拌至样品溶解，加入2~3滴甲基橙-苯胺蓝指示剂，用0.10 mol·L-1NaOH标准溶液滴定至溶液颜色由紫红色变为蓝绿色即为终点，根据所消耗的NaOH标准溶液体积和加入的HCl标准溶液体积计算壳聚糖样品的脱乙酰度。 .2 双指示剂法