TaqMan_MGB探针检测文森巴尔通体博_省略_霍夫亚种实时荧光定量PCR方法.pdfVIP

Research Paper 研究报告 微生物学报Acta Microbiologica Sinica 53 (9):976 － 983 ;4 September 2013 ISSN 0001 － 6209 ;CN 11 － 1995 / Q http :/ /journals． im． ac． cn / actamicrocn TaqMan-MGB 探针检测文森巴尔通体博格霍夫亚种实时荧光 定量PCR 方法的建立及应用 ， ， ， 栗冬梅 宋秀平 王君 刘起勇 ， ， ， 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室 世界卫生组织媒介生物监测与管理合作中心 北京 102206 :【 】 TaqMan-MGB ， 、 PCR ， 摘要 目的 应用 探针技术 建立具有种水平特异性 高敏感性的荧光定量 方法 用于快 。【 】 (Sequence characterized amplified 速检测文森巴尔通体博格霍夫亚种 方法 在序列特异性扩增区标记 region ，SCAR) ， ， 技术基础上 依据文森巴尔通体博格霍夫亚种一段特有的基因序列设计探针和引物 分别优化 、 ; 、 ; ， 扩增反应的退火温度 探针和引物的反应浓度 分析此方法的特异性 敏感性及重复性 绘制标准曲线 评估 PCR 。【 】 TaqMan-MGB ; 反应的扩增效率和稳定性 结果 本研究设计的 探针具有种水平特异性 最低检出限为 PCR 11 ; CV 0. 12% － 0. 70% 0. 14 % － 0. 55% ， 每个 反应 个拷贝 组内和组间的变异系数 值分别为 和 在允许 ; (R2 = 1)， (E = 104. 7 %)。【 】 TaqMan- 范围内 标准曲线线性关系良好 扩增效率高 结论 本研究建立的基于 MGB PCR 、 ， 探针技术的荧光定量 方法能够在种水平特异性 高灵敏度检出文森巴尔通体博格霍夫亚种 为这 、 。 种巴尔通体所引起的一系列疾病的早期快速诊断 监测和流行病学调查等研究提供有效手段 : ， PCR ，TaqMan-MGB ， ，SCAR 关键词 巴尔通体 荧光定量 探针 犬 标记 中图分类号:Q93-3 文献标识码:A 文章编号:000 1-6209 (20 13)09-0976-08 (Bartonella vinsonii 。 文森巴尔通体博格霍夫亚种 核酸分子 分离培养方法虽然