联合干预离子通道提高PVDF膜富集胎儿有核红细胞的效率.pdfVIP

2010 1 28 1 Chin J C lin Lab Sci, Jan. 20 10, Vol. 28, No. 1 # 13# : 100 1-764X ( 2010) 0 1-013-03 # # PVDF * 1, 3 1 1 1 2 程宁 , 张丽娜 , 徐向红, 刘芳 , 白亚娜 (兰州大学 1. 生殖健康与出生缺陷研究中心; 2. 公共卫生学 流行 病与卫生统计学研究所; 3. 甘肃省新药临床前研究重点实验室, 兰州730000) + + - : 通过干预细胞膜阴离子通道( AE)和 Na /K /2C l 离子共转运体( NKCC ), 提高聚偏二氟乙烯( PVDF) 膜富集脐 血有核红细胞 ( NRBC) 的效率 以密度为 1. 067的分离液分离NRBC, 用 AE 抑制剂维拉帕米( erapam il) 和NKCC抑制 剂呋噻米( furosem ide)联合干预, 用流式细胞技术和巢式 PCR 观察干预前后离心法和过 5 Lm 孔径 PV DF 膜法富集 NRBC的 效率 最佳离心分离密度梯度为 1. 067流式细胞仪检测离心分离的 NRBC 平均纯度为 2. 54% , 干预后离心分离 NRBC纯度为 9. 36% , NRBC 富集率提升近 3. 7倍; 过 PVDF 膜前 NRBC 为 0. 83% , 过膜后NRBC 为 6. 15% , 干预后过膜将 NRBC富集率提升了 7. 4倍用巢式 PCR 检测, 每 m l血样中NRBC为 120 个时, 干预后过膜的扩增条带的密度值由4. 48升高 至17. 78, 提升近 4倍 维拉帕米和呋噻米能够通过改变脐血细胞性状, 提高 NRBC 通过 PVDF 膜的效率 : 胎儿有核红细胞; 维拉帕米; 呋噻米; 聚偏二氟乙烯膜; 流式细胞仪; 巢式 PCR : Q813. 1 : A Increased enrichm ent of fetal nuclear red blood cells v ia polyv inylidene difluoride by combined interfering m em brane ionic channels 1, 3 1 1 1 2 CHEN G N ing , ZHAN G L i-na , X UX iang-hong , LIU Fang , BA I Ya-na ( 1. Cen ter of Rep rod ctiveH ealth and B irth Def ects; 2. Instit te of Ep id em iology and Statistics, M edical School; 3. Gans ProvinceK ey Laboratory of P reclinical St dy f or N ew M ed icine, Lanzho University, Lanzho 730000, China) Abstract: Objective The effecti eness on the enrichm en t of nuclear red b lood cells ( NRBC ) in umb ilical cord blood by poly inyl-i dene difluoridem em brane was in estigated w ith inter ention on m em brane ionic channels. M ethods NRBC was isolated by the isola- tion solution w ith a density of 1. 067 g/m l. The rates of the cell enrichm en t using erapam il and furosem ide inter ention by d iscontinu- ous densit