养心通脉片对家兔AS斑块新生血管及血管生长因子的影响.pdfVIP

养心通脉片对家兔AS 斑块新生血管及血管生长因子 的影响1 袁肇凯，杨涛，胡志希，黄献平，陈清华，明荷，莫莉，孙贵香 湖南中医药大学，长沙（410007 ） E-mail ：yuanzk1520@ 摘 要：目的：观察养心通脉片对家兔动脉粥样斑块新生血管及血管生长因子的影响。 方法：参照“ 高脂饲养喂饲法”造模，设养心通脉片组和辛伐他汀片组、模型组和健康 对照组，分别用养心通脉片、辛伐他汀片稀释液及蒸馏水灌胃灌胃。30 天后，取各组 兔主动脉斑块，检测斑块面积、新生血管数及血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞 生长因子(bFGF)和凝血酶敏感蛋白-1 （TSP-1 ）。结果：与模型组比较，养心通脉片组 动脉斑块的面积明显减小，斑块新生血管的数量显著降低，斑块中VEGF 和bFGF 的 表达量显著降低，TSP-1 的光密度值明显增高；而养心通脉片组TSP-1 的含量上明显 高于辛伐他汀片组。结论：养心通脉片通过减少VEGF 、bFGF 表达，增加TSP-1 的含 量，从而抑制斑块内血管新生的过程，有效地逆转或消退动脉粥样硬化斑块。 关键词：动脉粥样硬化，养心通脉片，血管新生，血管生长因子 有研究表明，动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)患者的血管内膜深层因缺氧而诱导病理 性血管新生，尤其是有着较大脂质核心的不稳定斑块，新生血管的密度与 AS 斑块的厚度及 动脉管腔狭窄的程度呈正相关，血管新生促进 AS 的发展及其并发症的发生[1] 。因此抑制血 管新生是治疗 AS 的有效途径之一。本文通过养心通脉片对AS 家兔模型主动脉粥样斑块新 生血管及血管内皮生长因子(VEGF) 、成纤维细胞生长因子(FGF) 和凝血酶敏感蛋白-1 （TSP-1 ）等血管生长因子的检测分析，以探讨养心通脉片逆转、消退AS 斑块的作用机理。 兹报告如下： 1. 材料与方法 1.1 实验材料 1．动物 健康新西兰雄性家兔，体重为 2.5±0.5Kg/只，由湖南中医药大学动物中心提 供（许可证号：SYXK[湘]2003-0001 ）。 2 ．药物 ① 养心通脉片（Yangxin Tongmai Tablets ，YTT ），由湖南中医药大学中药 制剂教研室生产的片剂（批号，每片0.3g 。② 辛伐他汀片（Simvastatin Tablets， Sim），广州南新制药有限公司（国药准字），每片 10mg。 3 ．试剂 ① 一抗：抗兔 VEGF 抗体、抗兔 bFGF 抗体、抗兔 TSP-1 抗体；② SABC 试剂盒，包括封闭用血清、生物素化二抗；③ DAB 显色剂及 APES 粘片剂。以上均由武汉 博士德公司提供。 1.2 动物造模及分组处理 1．动物造模 取上述家兔 36 只，随机提取 8 只作为健康对照组，其余 28 只参照“高脂 饲养喂饲法”造模[2] 。以高脂饮食（在 80%普通饲料中加入 14%蛋黄粉、1%胆固醇、5%的猪 油）喂养，42 天后随机抽取 2 只处死，以血脂显著增高及胸主动脉出现斑块作为 AS 造模成 1本课题得到教育部博士点基金(20050541005)和湖南省教育厅重点项目(04A039)的资助。 - 1 - 功标志。造模成功的 24 只（成功率为 85.7%）再随机分为养心通脉片组、辛伐他汀片组和 模型组 3 组，每组 8 只。 2 ．分组处理 ①养心通脉片组（YTT 组），继续高脂饲料喂养，并给予养心通脉片药 液灌胃。②辛伐他汀片组（Sim 组），继续高脂饲料喂养，辛伐他汀片药液灌胃。③模型组 （Mod 组），继续高脂饲料喂养，蒸馏水灌胃。④健康对照组（Hea 组），普通饮食饲养，蒸 馏水灌胃。药物剂量均按“动物及人的体表面积比例”换算计量，均溶于 160ml 蒸馏水中灌胃， 每日 1 次，连续 30 天。 1.3 标本处理及观察指标 1．标本处理 分组处理结束，处死家兔，打开胸腹